题目内容

【题目】下图为科研工作者利用小鼠制备 H7N9 禽流感病毒单克隆抗体的过程,据图回答有关问题。

1)图中 X 细胞一般选用_________,与植物体细胞杂交相比,诱导 X 细胞和 Y 细胞融合还可采用_____

2)在杂种细胞培养过程中,为了防止污染,通常还要在培养液中添加一定量的_____________,其培养液与植物组织培养的培养基相比,特有的天然成分_____

3)单克隆抗体的制备过程需要多次筛选,首先用特定的选择性培养基筛选出 ________ 然后进行_____和专一抗体检测,最终获得足够数量的_________的细胞,选 出符合要求的细胞后,可在体外条件下培养或注射到_____内进行增殖。

4)利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒,用于准确、快速诊断 H7N9 禽流感病毒的感染者,这体现了单克隆抗体__________的特性。

【答案】骨髓瘤细胞 灭活的病毒 抗生素 动物血清(或动物血浆) 杂交瘤细胞 克隆化培养 能分泌所需(特异性/专一性)抗体的 小鼠腹腔 特异性强 灵敏度高

【解析】

分析题图:采用基因工程技术将H7N9病毒的抗原基因导入受体细胞,并使之表达;浆细胞能产生抗体,但不能无限增殖,而骨髓瘤细胞能无限增殖,但不能产生抗体,因此采用细胞融合技术将两者融合形成杂交瘤细胞,既可产生抗体,也能无限增殖,所以图中X细胞表示骨髓瘤细胞,Y细胞表示浆细胞。

1X细胞一般选择骨髓瘤细胞。诱导X细胞和Y细胞融合可采用化学试剂聚乙二醇(PEG)、辅助离心震动电刺激等物理方法,还可用灭活的病毒诱导其融合。与植物体细胞杂交相比,让动物细胞融合特有的方法是灭活的病毒诱导细胞融合。

2)在杂种细胞的培养过程中,通常还要在细胞培养液中添加一定量的抗生素,防止细菌污染。因为血液中还有一些未知的物质,因此动物细胞培养时,需要在培养基中加入动物血浆(血清)等天然物质。

3)单克隆抗体的制备过程需要经过多次筛选,首先用特定的选择性培养基(HAT培养基)筛选出杂交瘤细胞,该培养基上B细胞和B细胞融合细胞、瘤细胞和瘤细胞融合细胞不能生长。还需进行克隆化培养和专一抗体检测(使用特定的抗原决定簇进行检测),最终获得足够数量的能分泌所需(特异性/专一性)抗体的细胞,选出符合要求的细胞后,可在体外条件下培养或注射到小鼠的腹腔内进行增殖。

4)单克隆抗体能与抗原特异性结合,利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒,用于准确、快速诊断H7N9禽流感病毒的感染者,这种诊断运用了抗原抗体杂交技术,这体现了单克隆抗体理化性质单一、与抗原结合的特异性强、灵敏度高的特性。

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2)以家蚕为材料,研究昆虫抗药性遗传特性。测定生命力大致相同的多品种家蚕幼虫致死50%Bt浓度(LC50),结果如下:

家蚕品种

A

B

C

D

E

F

G

H

LC50mg/L

594

375

942

1186

1186

1187

1290

>375

1研究人员欲选择敏感型和抗药型家蚕为亲本进行杂交实验,据上表结果,最好选择家蚕品种是_______________

杂交实验及结果如下表:

亲本

实验一

♀抗药型

×♂敏感型

实验二

♀敏感型

×♂抗药型

实验三

实验一的

F1×抗药型

实验四

实验二的

F1×敏感型

实验五

实验一的

F1自交

实验六实验二的F1自交

子代

抗药型

0

0

67

0

37

34

敏感型

80

80

83

150

113

116

实验一和实验二的结果表明,家蚕抗药型是由位于____________染色体上的____性基因控制的;实验____的结果表明,F1产生两种配子且比例为11

3Bt毒蛋白与家蚕幼虫的中肠细胞特异性受体结合,使细胞膜穿孔,细胞裂解,幼虫死亡。为从分子水平上阐明家蚕产生抗药性的原因,研究人员从实验一亲本________________细胞中提取总RNA,获取cDNA,测定亲本受体基因碱基序列如图。

起始密码子

终止密码子

酪氨酸密码子

AUG/GUG

UAA/UAG

UAU/UAC

从分子水平推测家蚕抗药性产生的原是敏感型受体基因中插入3个碱基对,导致____(填写变异类型),进而在受体蛋白中插入一个氨基酸(酪氨酸),受体蛋白结构改变,使受体不能与Bt毒蛋白结合而产生抗药性。

4)依据Bt受体基因设计的靶向sgRNA,可以与限制酶Cas9结合,定点切除受体基因的39个核苷酸。sgRNACas9mRNA的混合物注射到____型家蚕受精卵中,若其发育成的家蚕幼虫表现为________,则进一步证明上述推测成立。

5)基因编辑技术能精确靶向修饰生物体基因组特定位点,人为改造生物体的遗传信息。请从利或弊某一方面说明该技术的应用是一把“双刃剑”: ____

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