题目内容
13．做微生物的分离与培养的有关实验时，下列叙述正确的是（ ）| A． | 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基时，将有关物质溶解后，用无菌水定容至1000mL | |
| B． | 倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上 | |
| C． | 为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落 | |
| D． | 进行系列稀释操作时，用移液管吸取相应的菌液注入试管后，还要用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，使菌液与水充分混匀 |
分析 1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：
（1）计算：依据是培养基配方的比例．
（2）称量：牛肉膏比较黏稠，可同称量纸一块称取．牛肉膏和蛋白胨易吸潮，称取时动作要迅速，称后及时盖上瓶盖．
（3）溶化：牛肉膏和称量纸+水加热取出称量纸→加蛋白胨和氯化钠→加琼脂（注意：要不断用玻璃棒搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂）→补加蒸馏水至100mL．
（4）调pH；
（5）灭菌：培养基采用高压蒸汽灭菌，培养皿采用干热灭菌．
（6）倒平板．
2、平板划线操作的注意事项：
①第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌；
②灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种；
③划线时最后一区域不要与第一区域相连；
④划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破．
解答 解：A、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基时，需要加蒸馏水，A错误；
B、倒平板时，用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（约10～20 mL）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，B错误；
C、为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应在培养基上冷却后才能挑取菌落，以免温度太高杀死菌种，C错误；
D、进行系列稀释操作时，用移液管吸取相应的菌液注入试管后，还要用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，使菌液与水充分混匀，D正确．
故选：D．
点评 本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的种类及配置方法，掌握接种微生物常用的两种方法及注意事项，能结合所学的知识准确判断各选项．
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