Question

20．为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注．我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系．
（1）若已获取耐盐基因的mRNA，可通过反转录 获取PG基因．
（2）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的a处，DNA连接酶作用于a处．（填“a”或“b”）
（3）将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和基因枪法（花粉管通道法）法．
（4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的耐盐基因（目的基因）作探针进行分子杂交检测导入是否成功，又要用一定浓度的盐水浇灌（移裁到盐碱地中）方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性．
（5）进行基因工程操作一般要经过的四个步骤是目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定．

Answer 1

分析 根据题意和图示分析可知：a处为磷酸二酯键，b处为氢键，限制酶的原理是作用在磷酸二酯键上，而不是氢键，在把表达载体导入受体细胞时，对于动物、植物、细菌是不一样的这里要区分清楚，最后一步在鉴定时可以用DNA分子杂交法，抗原抗体杂交法，还有特性验证试验法．最简单的就是移植到盐碱地中看是否具有抗性．

解答 解：（1）若已获取耐盐基因的mRNA，可通过反转录获取PG基因．
（2）图中a表示磷酸二酯键，是限制酶的切割位点，也是DNA连接酶的连接位点；b表示氢键，是解旋酶的作用位点．
（3）将重组DNA分子导入植物细胞的常用方法有农杆菌转化法、基因枪法或花粉管通道法．
（4）要确定耐盐转基因水稻是否培育成功，从分子水平上，需要用放射性同位素标记的目的基因做探针进行分子杂交检测；从个体水平上，又要用一定浓度的盐水浇灌方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性．
（5）进行基因工程操作一般要经过的四个步骤是目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定．
故答案为：
（1）反转录     
（2）a     a     
（3）基因枪法（花粉管通道法）
（4）耐盐基因（目的基因）    一定浓度的盐水浇灌（移裁到盐碱地中）
（5）目的基因的获取     基因表达载体的构建      将目的基因导入受体细胞      目的基因的检测与鉴定

点评 本题考查基因工程的原理和技术，要求考生识记基因工程的原理及相关工具，识记基因工程的操作步骤，识记目的基因导入受体细胞的方法，属于考纲中识记、理解层次的考查．