Question

20．下列实验操作正确的是（　　）

• A． 倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上
• B． 为了防止污染，接种环经火焰灼烧灭菌后趁热快速挑取菌落
• C． 为了防止冷凝水落入培养基，倒入培养基后，应立即将平板倒过来放置
• D． 高压灭菌到时后，待压力表的压力降到零时打开排气阀，以免灭菌容器内液体冲出

Answer 1

分析 1、无菌操作，包括灭菌和消毒两种方式，消毒的方法有巴氏消毒法、酒精消毒、煮沸消毒法；灭菌的方法有干热灭菌、灼烧灭菌和高压蒸汽灭菌；
2、微生物的接种：微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，常用来统计样品活菌数目的方法是稀释涂布平板法．
3、培养基配制时的注意事项：
①全程要求无菌操作，无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还能有效地避免操作者自身被微生物感染．
②培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板．可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，当感觉到锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板．操作时应使锥形瓶的瓶口通过火焰，以防止瓶口的微生物污染培养基．
③平板冷凝后皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，若将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染．
④在倒平板的过程中，不能将培养基溅到皿盖与皿底之间的部位，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生．

解答 解：A、倒平板过程中不能打开培养皿的皿盖，A错误；
B、接种环火焰上灼烧后，待冷却后才可以快速挑取菌落，B错误；
C、倒好培养基的培养皿，等培养基冷凝后要将平板倒过来放置，C错误；
D、高压灭菌到时后，待压力表的压力降到零时打开排气阀，以免灭菌容器内液体冲出，D正确．
故选：D．

点评 本题考查微生物的培养和分离，重点考查培养基的制备过程，要求考生识记培养基制备的具体步骤，掌握倒平板步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确判断各选项．