题目内容

18．白细胞介素4（IL一4）是具有多种免疫学调节功能的细胞因子，临床及研究中需要大量高纯度的IL一4，以及其高效检测试剂．如图是利用单克隆抗体技术制备抗IL一4特异性抗体的过程．回答相关问题：

（1）在免疫系统组成中，IL一4属于免疫活性物质．研究人员从外周血中提取到IL一4蛋白分子的mRNA，将其反转录成cDNA，构建特定表达载体，利用工程菌获得用于临床及研究需要的高纯度的IL一4蛋白．
（2）图中所示的a培养瓶中培养的是骨髓瘤细胞细胞，其与M细胞融合产生双核或多核细胞，再经有丝分裂，进一步形成两个新的单核杂交细胞．
（3）b培养瓶所示过程中，要用特定的选择性培养基进行细胞筛选，得到的融合的杂种细胞能在体外培养增殖生长．经b获得的细胞，还需要进行克隆化培养和抗体检测（克隆化培养和专一抗体阳性检测）．
（4）c培养瓶中培养的细胞是分泌抗IL-4抗体的杂交瘤细胞．制备IL一4单克隆抗体的过程中，细胞培养瓶通常置于特定培养箱中进行细胞培养，要求培养瓶松盖，主要目的是让氧气进入培养瓶以供细胞代谢、使二氧化碳加入培养瓶维持培养液的PH．

分析 1、单克隆抗体制备流程：
（1）对小鼠注射特定的抗原蛋白，使小鼠产生免疫反应；
（2）得到相应的B淋巴细胞；
（3）将小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，再用特定的选择培养基进行筛选；
（4）在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂种细胞才能生长（这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖又能产生专一的抗体）
（5）对上述杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足量的能分泌所需抗体的细胞；
（6）最后，将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖，这样，从细胞培养液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的单克隆抗体．
2、分析图示可知：M为具有免疫能力的B淋巴细胞、a为骨髓瘤细胞，b过程为对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，c为将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养．

解答 解：（1）白细胞介素4（IL一4）是具有多种免疫学调节功能的细胞因子．即在免疫系统组成中，IL一4属于免疫活性物质．对于真核基因而言，转录形成mRNA中遗传信息来自于外显子中的遗传信息，所以将mRNA反转录形成的是 cDNA．
（2）分析图可知：单克隆抗体由杂交瘤细胞产生的，由此可推出图中所示的a中培养的是骨髓瘤细胞．其与M细胞（具有免疫能力的B淋巴）融合产生双核或多核细胞，再经有丝分裂，进一步形成两个新的单核杂交细胞．
（3）骨髓瘤细胞与M细胞（具有免疫能力的B淋巴）融合，需要筛选，即：b培养瓶中用特定的选择性培养基进行细胞筛选，选出杂交瘤细胞．但这个杂交瘤细胞还需要进行克隆化培养和抗体检测（克隆化培养和专一抗体阳性检测），才可以得到能无限增殖并能产生专一性抗体的杂交瘤细胞．
（4）提取单克隆抗体可以体外提取，也可以体内提取，c培养瓶所示是体外提取，即c培养瓶中培养的细胞是分泌抗IL-4抗体的杂交瘤细胞．动物细胞培养通常置于特定培养箱中进行细胞培养，要求培养瓶松盖，主要目的是让氧气进入培养瓶以供细胞代谢、使二氧化碳加入培养瓶维持培养液的PH．
故答案为：
（1）免疫活性       cDNA
（2）骨髓瘤细胞      有丝分裂
（3）融合的杂种     克隆化培养和抗体检测（克隆化培养和专一抗体阳性检测）
（4）分泌抗IL-4抗体     让氧气进入培养瓶以供细胞代谢、使二氧化碳加入培养瓶维持培养液的PH

点评 本题结合图解，考查人体免疫系统在维持稳态中的作用、单克隆抗体的制备，要求考生识记人体免疫系统的组成，掌握体液免疫和细胞免疫的具体过程；识记单克隆抗体的制备过程，能结合图中和题中信息答题．

练习册系列答案
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