如图表示为平板划线法分离纯化细菌示意图．根据所学生物学知识.完成下列问题．(1)微生物所需的营养成分包括碳源.氮源.水和无机盐．(2)培养微生物时.除考虑微生物生长所需的营养外.还要考虑微生物生长所需的温度.pH以及是否需要O2等．(3)若要从环境中分离纯化出所用的微生物.则具体方法应是:第一步:配制培养基．该培养基必须含有微生物生� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

17．如图表示为平板划线法分离纯化细菌示意图．根据所学生物学知识，完成下列问题．

（1）微生物所需的营养成分包括碳源、氮源、水和无机盐．
（2）培养微生物时，除考虑微生物生长所需的营养外，还要考虑微生物生长所需的温度、pH以及是否需要O₂等．
（3）若要从环境中分离纯化出所用的微生物，则具体方法应是：
第一步：配制培养基．该培养基必须含有微生物生长所需要的基本营养成分．
第二步：灭菌．对培养基用高压蒸汽方法进行灭菌．
第三步：接种．在固体培养基上，微生物常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法．
第四步：培养．在适宜温度下培养．一般用平板倒置的方法进行培养，这样可以防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养基造成污染．
第五步：挑选符合要求的菌落．
（4）做如图所示的操作时，为保证每次划线都从上次划线末端的微生物浓度开始，所以每次划线前都要对接种环灼烧灭菌，平板划线结束后，最后一次划的线不能与第一次划的线相交（相接、相连、交叉等）．
（5）脲酶可以将尿素分解为氨，从而使尿素溶液pH升高，这可用酚酞试剂来检验．用纤维素做唯一碳源的培养基培养微生物，得到的纤维素分解菌中可能还混杂有自养微生物（硝化细菌）．
（6）抗生素可以抑制肽聚糖合成，从而可以抑制多数原核生物繁殖．实验室现有酵母菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌三种微生物混杂生长的固体培养基，已知大肠杆菌菌落遇伊红-美蓝试剂变为紫色，并带有金属光泽；金黄色葡萄球菌耐高浓度食盐水，菌落为金黄色；酵母菌细胞壁成分主要为几丁质，营养条件好，氧气充足，显微镜下可见典型的出芽生殖．现在请你设计一个合理的实验方案，从一个培养基中，将三种微生物一次分离开来．（所需试剂可自选）
实验方案：根据菌落颜色，首先分离出金黄色葡萄球菌，然后向培养基中加入伊红-美蓝，将变为紫色，带有金属光泽的菌落分离出来，得到大肠杆菌，然后加入非磺胺类抗生素如青霉素，将培养基中的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌杀死，得到酵母菌．

分析本题考查多为识记内容，如培养基的成分、微生物生长条件、常用的灭菌方法等：平板划线法时如果划线相重合则不能分离出纯种；酚酞可检验碱性溶液，用纤维素做唯一碳源的培养基培养微生物，得到纤维素分解菌，但自养菌可以利用空气中的二氧化碳，也能生存，需要进一步分离，根据条件可以将不同菌分离开来．

解答解：（1）微生物的营养物质主要包括体液、氮源、水和无机盐等．
（2）培养微生物时，除考虑微生物生长所需的营养外，还要考虑微生物生长所需的温度、pH及是否需要O₂等．
（3）第二步：培养基常采用高压蒸汽灭菌法灭菌．
第三步：固体培养基上的接种方法主要有平板划线法和稀释涂布平板法．
第四步：在适宜温度下培养微生物．为防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养基造成污染，一般用平板倒置的方法．
（4）平板划线操作时为保证每次划线都从上次划线末端的微生物浓度开始，所以每次划线前都要对接种环灼烧灭菌．最后一次划的线不能与第一次划的线相交．
（5）脲酶可以将尿素分解为氨，从而使尿素溶液pH升高，酚酞可检验碱性溶液．用纤维素做唯一碳源的培养基培养微生物，得到纤维素分解菌，但自养菌可以利用空气中的二氧化碳，也能生存，需要进一步分离．
（6）根据题意，该实验方案应该设计为：根据菌落颜色，首先分离出金黄色葡萄球菌，然后向培养基中加入伊红-美蓝，将变为紫色，带有金属光泽的菌落分离出来，得到大肠杆菌，然后加入非磺胺类抗生素如青霉素，将培养基中的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌杀死，得到酵母菌．
故答案为：
（1）碳源　氮源
（2）pH
（3）高压蒸汽　平板划线法　稀释涂布平板法　　平板倒置
培养皿盖上凝结的水珠落入培养基造成污染
（4）对接种环灼烧灭菌　相交（相接、相连、交叉等）
（5）酚红指示剂　自养微生物（硝化细菌）
（6）方案：根据菌落颜色，首先分离出金黄色葡萄球菌，然后向培养基中加入伊红-美蓝，将变为紫色，带有金属光泽的菌落分离出来，得到大肠杆菌，然后加入非磺胺类抗生素如青霉素，将培养基中的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌杀死，得到酵母菌．（分离顺序不唯一，答案合理即可）