题目内容

1．Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞．科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗．其技术流程如图：

（1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的细胞核．
（2）步骤②中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其内细胞团分离出ES细胞．
（3）步骤③中，需要构建含有基因Rag2的表达载体．可以根据Rag2基因的 设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段．用HindIII和PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段．为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有HindⅢ和PstⅠ酶的酶切位点．该基因表达载体上除含Rag2基因外，还应含有启动子、终止子、标记基因、复制原点（至少写出两个）．用显微注射方法将基因表达载体导入ES细胞．
（4）为检测Rag2基因的表达情况，利用抗原抗体杂交（分子杂交）原理，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质，用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验．

分析 分析题图：图示是利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗的过程图解，其中①表示核移植过程，②表示早期胚胎培养过程，③表示采用基因工程技术将目的基因导入受体细胞．

解答 解：（1）核移植是将体细胞核移植到去核的卵母细胞中，所以实验前要去除卵母细胞的细胞核．
（2）内细胞团位于囊胚中，所以重组胚胎培养到囊胚期．
（3）Rag2基因是利用限制酶HindⅢ和PstⅠ切割获得的，所以表达载体应具有HindⅢ和PstⅠ的酶切位点．基因表达载体的组成包括启动子、终止子、标记基因、复制原点、目的基因（Rag2基因）．将目的基因导入动物细胞最有效的方法是纤维注射法．
（4）基因表达的产物是蛋白质，所以提取小鼠骨髓细胞的蛋白质进行抗原-抗体杂交．
故答案为：
（1）细胞核
（2）囊胚  
（3）HindⅢ和PstⅠ启动子、终止子、标记基因、复制原点   显微注射
（4）抗原抗体杂交（分子杂交）     蛋白质

点评 本题结合图解，综合考查基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题；识记核移植的具体过程；识记体外受精的具体过程及早期胚胎发育的过程，能结合所学的知识准确答题．

练习册系列答案
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11．下列关于神经调节的叙述，错误的是（　　）
A．突触后膜可以位于轴突处
B．乙酰胆碱受体具有识别化学信号和离子通道的双重功能
C．膝反射中，反射中枢就是传入神经元与传出神经元之间的突触
D．兴奋的神经纤维与邻近另一根神经纤维之间可形成局部电流，使后者产生动作电位
12．关于人体内环境与健康的叙述，错误的是（　　）
A．毛细血管壁细胞生活的液体环境是组织液、血浆等
B．内环境pH恢复正常是由于缓冲物质的存在
C．长期蛋白质营养不足，会造成组织水肿
D．运动后Na+、K+排出体外较多，机体的内环境就不能维持稳定状态
9．为了调查赣江的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作．回答下列问题：
（1）制备实验所需的培养基时，在各成分都溶化后和分装前，要进行的是调整pH和灭菌，对培养基进行灭菌的常用方法是高压蒸汽灭菌．倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要原因是防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染．
（2）该小组可采用图②所示的稀释涂布平板法（方法）检测水样中的细菌含量．在接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是检测培养基平板灭菌是否合格；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37．据此可得出每升水样中的活菌数为3.8×107．
（3）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌．操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线．这样做的目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落不连续单个菌落．
（4）在纯化过程中，在固体培养基上划线分离过程中，正确的操作是D
A．每次划线时，接种环都需要蘸菌液一次
B．划线分离时，需要把接种环深入到培养基中进行接种
C．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连
D．在超净平台中进行接种时，不能关闭过滤风．
16．图甲为人的红细胞膜的结构示意图及葡萄糖和乳酸的跨膜运输情况，图乙表示物质运输曲线，图丙中A为1mol/L的葡萄糖溶液，B为1mol/L的乳糖溶液，半透膜上有图甲中的蛋白质 ①．相关叙述正确的是（　　）
A．图甲中乳糖跨膜运输均与氧气浓度有关
B．图甲中葡萄糖的运输可以用图乙中的M表示
C．葡萄糖和乳糖的运输与细胞膜的流动性无关
D．图丙到液面不再变化时，右侧液面高于左侧液面
6．回答下列关于生物技术实践的问题：
（1）传统发酵技术中，利用微生物发酵生产特定的产物，很多都是中华民族的传统食品．请将下列微生物与对应的发酵产物联系起来：
①乳酸菌  ②根瘤菌  ③蓝藻  ④醋酸菌 ⑤毛霉  ⑥酵母菌  ⑦大肠杆菌  ⑧曲霉
制作果酒、果醋、腐乳、泡菜对应的主要微生物依次是⑥④⑤①（填相应序号）；其中泡菜制作的原理是（用反应式表示）：C6H12O6$\stackrel{酶}{→}$2C3H6O3（乳酸）．
（2）在培养基的配制过程中，具有如下步骤：
①溶化  ②调pH  ③加棉塞  ④包扎  ⑤分装  ⑥称量
正确的顺序为⑥①②⑤③④；倒平板操作中，平板冷凝后，要将平板倒置，其主要原因是防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染．
（3）菊花的组织培养中要求无菌操作的目的是防止杂菌污染（避免微生物在培养基上与离体培养的植物组织竞争），在愈伤组织形成过程中常用的培养基是MS培养基，并且需要添加植物激素；愈伤组织分化成根和芽，再由芽发育成叶和茎，这一过程称为再分化，此过程需要（填“需要”或“不需要”）光照．
13．生物学是一门实验科学，某中学的同学在高一时用牵牛花做杂交实验，高二时得到子代，结果如表所示：
父本母本子代
一班1朵红花1朵红花298朵红花、101朵蓝花
二班1朵蓝花1朵蓝花红花、蓝花（没有意识到要统计数量比）
三班1朵红花1朵蓝花红花、蓝花（没有意识到要统计数量比）
四班1朵红花1朵红花全红花
（1）若四个班的同学没有进行交流，且均以为花色仅受一对等位基因控制，则哪两个班一班和二班对显隐性的判断刚好相反．四个班经过交流后，对该现象提出了两种可能的假说：
假说一：花色性状由三个复等位基因（A+、A、a）控制，其中A决定蓝色，A+和a都决定红色，A+相对于A、a是显性，A相对于a是显性．若该假说正确，则一班同学所用的两朵亲代红花的基因型组合方式可能为①
A+A×A+A，②A+A×A+a两种情况．
假说二：花色性状由三个复等位基因（A、ai、a2）控制，只有a1和a2在一起时，才会表现为蓝色，其它情况均为红色，A相对于ai、a2为显性．能否仅根据一班F1的数量比判断哪种假说是正确的？不能 （能/不能）．
（2）将一班F1中的蓝色花进行自交得一班F2，将二班F1中的红色花自交得二班F2．到了高三，统计得到一班F2中红花个体和蓝花个体各占一半，则一班同学可以据此判断自己高一时所用的两朵红花亲本的基因型为Aa1和Aa2，并且可推测二班F2中的花色比例应为全为红花，而这个推测数据和二班同学实验得到的真实数据吻合，表示我们的假说二（填“一”或“二”）是对的．同学们探索牵牛花色遗传方式的这种思路在科学研究中被称为假说-演绎法．
8．如图表示某生态系统中甲、乙两种群在一段时间内的数量变化情况．下列有关叙述不正确的是（　　）
A．甲种群含有的能量比乙种群多
B．乙种群固定的能量为流经此生态系统的总能量
C．两种群呈现的数量变化与生态系统的信息传递有关
D．若长期受重金属污染，甲种群体内重金属浓度小于乙种群

制作果酒、果醋、腐乳、泡菜的主要微生物从细胞结构来看（ ）

A．四种均为真核生物

B．四种均为原核生物

C．三种真核生物，一种原核生物

D．两种真核生物，两种原核生物

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