题目内容
1．下表是基因工程中几种限制酶识别序列及其切割位点．图是转基因香蕉的培育过程，含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点．| 限制酶 | BamH | Hind | EcoR | Sma |
| 识别序列及切割位点 | ↓ GGATCC CCTAGG ↑ | ↓ AAGCTT TTCGAA ↑ | ↓ GAATTC CTTAAG ↑ | ↓ CCCGGG GGGCCC ↑ |
（1）从转基因香蕉培育图中反映了质粒作为运载体的特点是有多个酶切位点、有标记基因、能在宿主细胞内复制并稳定保存，基因工程中还可以用噬菌体或动植物病毒作为运载体．
（2）图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaI酶切割，原因是SmaI酶会破坏目的基因和质粒．
（3）图是用BamHⅠ和HindⅢ（限制）酶进行切割得到的目的基因．可以防止含目的基因的外源DNA片段切割后自身环化．
分析 分析DNA分子片段图：根据图1中DNA片段两侧的黏性末端可知，左侧是用限制酶BamHI切割形成的，右侧是用限制酶HindⅢ切割形成的．
分析流程图：①表示基因表达载体的构建过程；②表示将重组质粒导入农杆菌；③表示采用农杆菌转化法将目的基因导入香蕉组织细胞；④表示脱分化过程；⑤表示再分化过程．
解答 解：（1）质粒作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点； ②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来．基因工程中还可以用病毒（噬菌体或动植物病毒）作为运载体．
（3）SmaI酶会破坏目的基因和质粒的标记基因（抗性基因），因此图中构建重组质粒时不能使用SmaI酶切割．
（3）根据图中DNA片段两侧的黏性末端可知，左侧是用限制酶BamHI切割形成的，右侧是用限制酶HindⅢ切割形成的，这样可以防止含目的基因的外源DNA片段切割后自身环化．
故答案为：
（1）有多个酶切位点、有标记基因、能在宿主细胞内复制并稳定保存 噬菌体或动植物病毒
（2）SmaI酶会破坏目的基因和质粒
（3）BamHⅠ和HindⅢ
点评 本题结合图表，考查基因工程和细胞工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作工具、操作步骤及相关细节；识记植物组织培养的过程及条件，能正确分析题图，再结合所学的知识准确答题．
练习册系列答案
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