题目内容

11.回答基因工程的基本操作程序中的有关问题.
(1)目的基因的获取:为在短时间内大量获得目的基因,可用PCR技术扩增的方法,其原理是DNA复制.
(2)基因表达载体的构建:基因表达载体的组成,除具有复制原点、目的基因外,还必须具有启动子、终止子、标记基因等.启动子是一段有特殊结构的DNA片段,是RNA聚合酶识别和结合的部位.标记基因的作用是为了鉴别和筛选含有目的基因的细胞.
(3)将目的基因导入受体细胞:将目的基因导入某单子叶植物细胞,常采用的方法是基因枪法;将目的基因导入动物细胞,常采用的受体细胞是受精卵;将目的基因导入大肠杆菌,大肠杆菌应先用Ca2+处理,使其成为感受态细胞.
(4)目的基因的检测与鉴定:检测目的基因是否表达,在分子水平上可采用的检测办法是抗原-抗体杂交;在个体水平上,如抗虫棉,需要做抗虫的接种实验.

分析 基因工程技术的基本步骤:
(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成.
(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等.
(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法.
(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等.

解答 解:(1)目的基因的获取方法有:从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成.其中PCR技术可在短时间内大量获得目的基因,其原理是DNA复制.
(2)基因表达载体的组成包括复制原点、目的基因外、启动子、终止子、标记基因等,其中启动子是一段有特殊结构的DNA片段,是RNA聚合酶识别和结合的部位.标记基因的作用是为了鉴别和筛选含有目的基因的细胞.
(3)将目的基因导入某单子叶植物细胞,常采用基因枪法;将目的基因导入动物细胞常采用的受体细胞是受精卵,因为受精卵的全能性最高;将目的基因导入大肠杆菌,常用感受态转化法,即大肠杆菌应先用Ca2+处理,使其成为感受态细胞.
(4)目的基因的检测与鉴定:检测目的基因是否表达,在分子水平上可采用的检测办法是抗原-抗体杂交;在个体水平上,如抗虫棉,需要做抗虫的接种实验.
故答案为:
(1)PCR技术   DNA复制
(2)终止子   RNA聚合酶    鉴别和筛选含有目的基因的细胞
(3)基因枪法  受精卵     Ca2+
(4)抗原-抗体杂交    抗虫的接种实验

点评 本题考查基因工程的相关知识,要求考生识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤,掌握各操作步骤中需要注意的细节,能结合所学的知识准确答题.

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