题目内容

【题目】我国一科研团队将小麦液泡膜Na+/K+逆向转运蛋白基因(TaNHX2基因)转移到水稻细胞内,获得了转基因耐盐水稻新品种。回答下列有关问题:

(1)我们可以通过人工方法合成TaNHX2基因,如图1表示人工合成了两条若干个碱基的DNA单链,两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段,再利用Klenow酶补平,获得双链DNA。从功能看,Klenow酶是一种__________酶,获取目的基因的方法还有______________、____________。

(2)图2是3种限制酶的识别与酶切位点示意图,构建基因表达载体的时候,经BamH I酶切割得到的目的基因可以与图3所示质粒被_______________酶切后的产物连接,理由是________________________。连接后的重组质粒___________________(填“能”、“不能”或“不一定能”)被BamH I切割。

(3)基因表达载体通过农杆菌转化作用,就可以使目的基因进入某植物根细胞,并将其_______________,使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。若要使该细胞再生出转基因植株需要采用_______技术。

(4)小麦与水稻差异很大,但却通过基因重组后,水稻能够合成小麦的蛋白质,这是因为_______________。

【答案】DNA聚合 从基因文库中获取 PCR技术扩增目的基因 Sau3 A I 和Sau3A I两种酶切割片段产生的黏性末端互补 不一定 插入到植物细胞的染色体DNA上 植物组织培养 小麦和水稻共同一套遗传密码

【解析】

基因工程技术的基本步骤:

(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

(1)由图1可知,利用Klenow酶补平,获得双链DNA。由此可见,Klenow酶是一种DNA聚合酶,获取目的基因的方法还有从基因文库中获取、PCR技术扩增目的基因。

(2)由图2可知,BamH I酶和Sau3A I两种酶切割片段产生的黏性末端互补,故BamH I酶切割得到的目的基因可以与图3所示质粒被Sau3A I酶切后的产物连接。连接后的重组质粒可能形成不同的序列,所有不一定能再被BamH I切割。

(3)基因表达载体通过农杆菌转化作用,就可以使目的基因进入某植物根细胞,并将其插入到植物细胞的染色体DNA上,使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。若要使该细胞再生出转基因植株需要采用植物组织培养技术。

(4)小麦与水稻差异很大,但小麦和水稻共同一套遗传密码,故通过基因重组后,水稻能够合成小麦的蛋白质。

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