Question

【题目】近日，患罕见重症“视神经脊髓炎谱系疾病”10年、双目相继失明的20岁女孩小易，在中南大学湘雅医院首次采用基因工程重组“蛋白A免疫吸附柱”进行救治并获得成功，她右眼得以重见光明，并于日前康复出院。请回答下列有关基因工程的问题：

（1）金黄色葡萄球菌蛋白A能够特异性地与多种哺乳动物的抗体结合，但金黄色葡萄球菌为致病菌，因此，通过规模化培养金黄色葡萄球菌的方法来获取蛋白A有一定风险，需要进行基因工程操作来解决上述问题：将__________基因插入到基因工程最常用的运载替____________中，需要用到的工具酶有____________。此过程属于基因工程操作四步曲的第_____________步，即_____________。

（2）经过上述操作后，选用大肠杆菌作为表达宿主菌，使其大量表达蛋白A并制成基因工程重组“蛋白A免疫吸附柱”。重组质粒能够整合到大肠杆菌的核DNA上，原因是_________________。检测目的基因是否转录出了mRNA所用的技术名称为______________。

（3）将_____________类疾病患者的血浆输入吸附柱，让吸附柱上的基因工程重组葡萄球菌蛋白A分子，快速“抓住”并清除患者血浆中的致病性抗体，再让净化后的血液回输到人体内，如此循环往复，持续清除血液中的致病物质，从而达到救治目的。

Answer 1

【答案】蛋白A合成（金黄色葡萄球菌蛋白A） 质粒 限制酶和DNA连接酶 二 基因表达载体的构建 不同生物的DNA具有相似的结构 分子杂交技术 自身免疫病

【解析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定。

（1）将目的基因即蛋白A合成基因插入到质粒中，需要用到的工具酶有限制酶和DNA连接酶。这是基因工程操作四步曲的第二步，即基因表达载体的构建。

（2）重组质粒能够整合到大肠杆菌的核DNA上，原因是不同生物的DNA具有相似的结构。检测目的基因是否转录出了mRNA所用的技术名称为分子杂交技术。

（3）将疾病患者的血浆输入吸附柱，让柱子上的基因工程重组葡萄球菌蛋白A分子，快速“抓住”并清除患者血浆中的致病性抗体，再让净化后的血液回输到人体内，如此循环往复，持续清除血液中的致病物质，从而达到救治自身免疫病患者的目的。