Question

如图是从酵母菌中获取某植物需要的某种酶的基因的流程，结合所学知识及相关信息回答下列问题：
（1）图中cDNA文库

 

基因组文库（大于、等于、小于）．
（2）①过程提取的DNA需要

 

的切割，B过程是

 

过程．
（3）为在短时间内大量获得目的基因，可用的技术是

 

，其原理

 

．
（4）目的基因获取之后，需要构建基因表达的载体，其组成必须有

 

及标记基因等，此步骤是基因工程的核心．
（5）将该目的基因导入某双子叶植物细胞，常采用的方法是

 

，其能否在此植物体内稳定遗传的关键是

 

，可以用

 

技术进行检测．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：1、基因文库是指将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入到受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因．包括基因组文库（包含某种生物所有的基因）和部分基因文库（包含某种生物的部分基因，如cDNA文库）．
2、PCR技术扩增目的基因（适用于目的基因的核苷酸序列已知的情况）．PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，其原理是DNA复制，需要模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶），以指数的方式扩增，即约2n．
3、基因表达载体的构建是基因工程的核心．目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用．基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因．
4、将目的基因导入受体细胞，如受体细胞是植物细胞，常用农杆菌转化法（约80%的转基因植物都是用这种方法获得的），具体过程：目的基因插人Ti质粒的T-DNA上

导入

农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达．另外，还可用基因枪法和花粉管通道法；如果受体细胞是动物细胞，常用显微注射技术；如果受体细胞是微生物细胞，用Ca2+处理细胞→感受态细胞→表达载体与感受态细胞混合（在缓冲液中）→一定温度下，感受态细胞吸收DNA分子，完成转化．

解答： 解：（1）基因组文库包含某种生物所有的基因．部分基因文库包含某种生物的部分基因．如：cDNA文库．
（2）①过程是获取目的基因，需要限制酶切割．B过程是有mRNA获取DNA过程，是反转录过程．
（3）PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，其原理是DNA复制．
（4）基因表达载体的构建是基因工程的核心．目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用．基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因．
（5）受体细胞是双子叶植物，常用农杆菌转化法将目的基因转入到受体细胞中，利用农杆菌的Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上功能，能否转化成功，还需要用DNA分子杂交技术对受体细胞中DNA进行检测．
故答案为：
（1）小于
（2）限制酶           反转录
（3）PCR技术          DNA复制
（4）启动子、终止子、目的基因（复制原点可不答）
（5）农杆菌转化法    目的基因是否整合到植物细胞的染色体上     DNA分子杂交

点评：本题考查了基因工程过程和应用的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系；理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力和从题目所给的图形中获取有效信息的能力．