题目内容

18．如图是转基因抗虫棉花的培育过程示意图，请据图分析回答问题：

注：①HindⅢ，BamHⅠ、SalⅠ为限制酶，识别的序列分别为-A↓AGCTT-、-G↓GATCC-、-G↓TCGAC-．
②影印培养法是一种类似“盖章”的接种方法．用灭菌的丝绒布制成的“印章”将培养基A上菌落中的细菌接种到培养基B的相同位置上，待培养一段时间后，将两种培养基的相同位置上的菌落做对比．
（1）在构建重组质粒时，应选用限制酶SalⅠ和HindⅢ对目的基因和质粒进行切割．以保证重组DNA的序列是唯一的．
（2）用影印培养法是为了筛选出导入了目的基因的农杆菌，培养基A和B在成分上的区别是抗生素种类不同，培养基A中是氨苄青霉素，培养基B中是四环素．应选择菌落4和6中的农杆菌将抗虫基因导入棉花细胞．将农杆菌接种到培养基A上所使用的方法是稀释涂布平板法．
（3）愈伤组织形成后一般要将其先转接到丛芽（填“生根”或“丛芽”）培养基上．
（4）经抗虫接种实验从培养出的棉花植株中筛选出抗虫个体，可利用PCR技术快速获得大量抗虫基因，用于扩增的引物应选择下网中的a和d．

分析 分析题图：质粒和含抗虫基因的DNA片段上均有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制性核酸内切酶酶切位点．
在质粒上，这三种限制酶的切割位点都位于抗四环素基因上，用其任何一种酶都会破坏四环素抗性基因；在含抗虫基因的DNA片段上，BamHⅠ位于目的基因上，用BamHⅠ切割会破坏目的基因．

解答 解：（1）要保证重组DNA的序列是唯一的，且防止自身环化，应选用两种限制酶分别切割目的基因和质粒，且不能破坏目的基因，故只能选用限制酶SalⅠ和HindⅢ．
（2）导入了重组质粒的农杆菌中有氨苄青霉素抗性无四环素抗性，导人了质粒的农杆菌中既有氨苄青霉素抗性也有四环素抗性，根据这个特点应先将农杆菌涂布在含氨苄青霉素的培养基（A）表面，长出的菌落中农杆菌含重组质粒或质粒，再通过影印培养，将这些菌落中的细菌接种到含四环素培养基（B）的相同位置上，待培养一段时间后，将这两种培养基的相同位置上菌落做对比，在培养基A上出现、在培养基B上不出现的菌落中农杆菌是导人了重组质粒的．
（3）愈伤组织形成后一般要将其先转接到丛芽培养基上，因丛芽能进行光合作用且能合成生长素，有利于生根．
（4）DNA复制过程中，子链的延伸端为3a'端，因此只能选择引物对a和d，才能通过PCR技术获得大量抗虫基因．
故答案为：
（1）SalⅠ和HindⅢ
（2）抗生素种类不同，培养基A中是氨苄青霉素，培养基B中是四环素   4和6   稀释涂布平板法
（3）丛芽
（4）a和d

点评 本题以转基因抗虫棉花的培育为素材，考查基因工程和植物组织培养的相关知识，意在考查考生的理解能力、识记能力和应用能力．

练习册系列答案
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（1）CFTR蛋白的功能是作为Cl-的通道．Cl-的跨膜运输方式为主动运输．
（2）CFTR是一种由1480个氨基酸组成跨膜蛋白，参照中心法则形式，写出CFTR蛋白合成过程中遗传信息传递途径CFTR的基因→mRNA→CFTR蛋白．
（3）编码CFTR的基因位于第7号染色体上．临床上70%囊性纤维病患者的CFTR蛋白在508位缺少苯丙氨酸，由此可知该类型的患者是CFTR基因中发生了基因中碱基对发生缺失，而改变了其序列．另有部分患者的CFTR蛋白的开始端氨基酸序列与正常蛋白质相同，但数目少于1480个，推测该类型的患者的此基因发生碱基替换，导致mRNA提前出现终止密码子．
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（1）构建表达载体需用的工具酶有限制酶和DNA连接酶
（2）经转化获得的农杆菌能够侵染油菜细胞并将插入了B基因的整合到受体细胞的上．可用含草丁膦的培养基来筛选含有目的基因的油菜受体细胞．培育转基因油菜主要运用了转基因技术和植物组织培养技术．
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B．幼苗M→P的过程是单倍体育种，二者体细胞的染色体数目相等
C．幼苗P细胞分裂过程中可以看到40或80条染色体
D．P的形成过程未经过地理隔离，因而P不是新物种
13．下列有关实验的内容和分析正确的是（　　）
选项实验内容分析
A组织中脂肪的鉴定脂肪被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色
B观察植物细胞的有丝分裂盐酸作用：解离根尖的同时也为染色创造酸性环境
C调查菊叶上蚜虫的种群密度可采用标志重捕法
D噬菌体侵染细菌的实验证明DNA是主要的遗传物质
A．AB．BC．CD．D
3．生物技术是一把双刃剑，既可以造福人类，也可能使用不当给人类带来灾难．请回答下列有关生物技术的安全性和伦理性问题：
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年份第1年第2年第3年第4年第5年第6年第7年
增长速率0.661.522.833.692.911.200.03
A．这7年中麻雀种群的数量呈“J”型增长
B．第6年时麻雀种群的年龄组成为衰退型
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（2015春•余江县校级期中）将植物横放，测量根和茎生长素浓度与其生长状况的关系如甲图所示，则曲线上M、N、P和Q点分别最可能对应乙图中的（ ）

A．a、b、c、d B．a、c、d、b

C．b、c、a、d D．b、a、c、d

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