题目内容
常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖，自然界中一些酵母菌能分解木糖产生酒精但对酒精的耐受能力较差。下面是利用木糖发酵产生酒精的酿酒酵母的培育过程，请分析回答下列问题。
(1)将自然界中采集到的葡萄带回实验室，用________将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，瓶中的液体经适当稀释后，用________方法接种于固体培养基上，在适宜的条件下培养，获得各种菌落。
(2)将培养基上的酵母菌菌株转接到以木糖为唯一碳源的培养基中，无氧条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌________。从存活的酵母菌提取DNA，并用PCR技术大量扩增目的基因。
(3)将目的基因连接到一种穿梭质粒(可以在大肠杆菌中复制和在酿酒酵母中表达的质粒)上。该质粒具有两种标记基因，即氨苄青霉素抗性基因和尿嘧啶合成酶基因。大肠杆菌被该质粒转化后，应接种于含________的培养基上进行筛选。将质粒导入酵母菌时，由于氨苄青霉素不能抑制酵母菌繁殖，应选择缺乏________能力的酿酒酵母作为受体菌。从细胞结构看，酵母菌不同于大肠杆菌的主要特点是________。
(4)对转基因酿酒酵母发酵能力进行测试，结果如图所示：
据图分析，将转基因酿酒酵母接种在以________为碳源的培养基中进行发酵能力测试，最初培养基中的________糖被快速消耗，随着发酵继续进行，转基因酿酒酵母能够___________________，说明所需菌株培育成功。
（1）无菌水 稀释涂布平板法 （2）不能利用木糖发酵（或缺乏木糖发酵途径）（3）氨苄青霉素 尿嘧啶合成 有核膜包被的细胞核 （4）葡萄糖和木糖 葡萄 利用木糖产生酒精，并且酒精浓度升高对木糖发酵无明显影响。
解析试题分析：(1)常用的微生物分离方法有平板划线法和稀释涂布平板法。平板划线法是用接种环在培养基表面连续划线过程中将聚集的菌体逐步分散到培养基的表面。最终分离到由一个细胞繁殖而来的菌落；稀释涂布平板法是先将菌液进行一系列梯度稀释，再涂布培养。稀释度足够高的培养液涂布的结果可形成单个菌落。(2)以木糖为唯一碳源的培养基是选择培养基，可以筛选出能利用木糖的酵母菌。(3)转入质粒的大肠杆菌对氨苄青霉素有抗性，故可以培养在含有氨苄青霉素的培养基上进行筛选。以缺乏尿嘧啶合成酶的酵母菌作为受体细胞，可以利用缺乏尿嘧啶的培养基筛选出导入质粒的酵母菌菌株。(4)图示实验结果表明，在葡萄糖大量消耗后，酵母菌仍能利用木糖快速产生酒精，说明转基因酵母菌培养成功。
考点： 本题考查微生物培养相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力和提取信息的能力。
1997年，科学家将动物体内的能够合成胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子重组，并且在大肠杆菌中表达成功。请据图回答：
1．首先根据胰岛素的氨基酸序列，推测出原胰岛素mRNA上的碱基序列，再根据 原则，用人工方法合成⑧DNA，通过这一过程获得了 基因。
2．图中①从大肠杆菌的细胞中提取 ，过程②须用 酶切割。
3．图中⑤表示的是 的过程，图中③表示的是 分子。
4．④过程表示将 分子导入 细胞。
5．若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因，并将之取代质粒pZHZ1(3.7kb，1kb=1000对碱基)上相应的E—F区域 (0.2kb)，操作过程见下图，那么所形成的重组质粒pZHZ2___________。
| A．既能被E也能被F切开 | B．能被E但不能被F切开 |
| C．既不能被E也不能被F切开 | D．能被F但不能被E切开 |
以下是某调查小组对某森林生态系统进行调查研究的情况，分析回答：
（1）物种组成是决定群落性质的最重要因素。为了统计群落的植物种类组成，在群落的中心部位选取样地，用随机取样法取样，首先要确定样方面积。系列取样统计结果如下图所示。
①试写出该研究的课题名称： 。
②据图可知：在一定范围内，随样方面积的增大， ；调查该森林物种数的样方面积最好是 m。
（2）调查小组对该生态系统的几种植物种群密度进行了连续五年的调查，调查的结果如下表所示（单位：株／m。）
 年份植物 | 2006 | 2007 | 2008 | 2009 | 2010 |
| A | 10.0 | 9.2 | 8.0 | 6.8 | 5.5 |
| B | 3.0 | 2.1 | 1.1 | 0.3 | 0.1 |
| C | 0.3 | 0.6 | 1.1 | 1.5 | 2.3 |
| D | 3.0 | 2.0 | 0.4 | 0 | 0 |