Question

如图为转基因抗病香蕉的培育流程图，选用的载体为pBR322质粒（Amp^r表示氨苄青霉素杭性基因，Tet^r表示四环素抗性基因），该质粒上的PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶的识别序列及切割位点见下表．请据图回答：

（1）图中①②表示组织培养过程中香蕉组织细胞的

 

．利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株，证明了香蕉组织细胞具有

 

．
（2）形成重组质粒A时，应选用的限制酶是

 

，对

 

进行切割．
（3）一个质粒被限制酶EcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ同时切割后可得到

 

个DNA片段，

 

个黏性末端．
（4）若要筛选出已导入抗病基因的香蕉细胞，可将被感染的香蕉组织细胞置于含有

 

的培养基上培养进行筛选，原因是

 

．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,植物培养的条件及过程

专题：

分析：分析题图：图示为转基因抗病香蕉的培育流程图，首先采用基因工程技术得到含有目的基因的受体细胞（获取目的基因、构建基因表达载体、采用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达）；其次采用植物组织培养技术将受体细胞培育成转基因植株，图中①表示脱分化、②表示再分化过程．

解答： 解：（1）由以上分析可知：①②表示植物组织培养过程，其中①表示脱分化、②表示再分化；植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性．
（1）含有目的基因的外源DNA分子含有限制酶Sma I、Pst I和EcoR I的切割位点，但限制酶Sma I的切割位点位于目的基因上，所以应选限制酶Pst I和EcoRI对目的基因和质粒进行切割．
（3）质粒会被限制酶EcoR I、Pst l、Sma I同时切割成三段，EcoR I、Pst l切割质粒形成的是黏性末端，且每种酶切割质粒后会形成两个黏性末端，Sma I切割形成的是平末端，所以三种限制酶切割质粒会形成四个黏性末端．
（4）用限制酶Pst I和EcoRI切割质粒后会破坏四环素抗性基因，但不会破坏氨苄青霉素抗性基因，因此要筛选出已导入抗病基因的香蕉细胞，可将被感染的香蕉组织细胞置于含有四环素的培养基上进行培养筛选．
故答案为：
（1）脱分化和再分化   全能性   
（2）PstI和EcoRI   含抗病基因的DNA和质粒  
（3）3    4  
（4）四环素   四环素抗性基因（Tetr） 的结构完整，但氨苄青霉素抗性基因（Ampr）的结构被破坏

点评：本题结合转基因香蕉形成的流程图，考查基因工程和植物组织培养的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤；识记植物组织培养的过程及原料，能结合图中信息准确答题．