题目内容

我国基因工程药物的研制和生产发展迅猛,下图是利用基因工程方法生产重组人生长激素的示意图。图中质粒表示基因工程中经常选用的载体—pBR322质粒,Ampr表示青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因。根据下图回答下列问题(限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ切割形成的末端均不相同):

(1)过程②必需的酶是   ,过程④必需的酶是    。⑤过程中为提高成功率,常用           溶液处理大肠杆菌。
(2)如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ对质粒pBR322进行切割,用一种酶、两种酶和三种酶分别切割时,则形成的DNA片段共     种,其中含有完整四环素抗性基因的DNA片段的比例是     。
(3)如果只用限制酶PstI切割目的基因和质粒pBR322,完成过程④、⑤后,将三角瓶内的大肠杆菌(不含Ampr、Tetr抗性质粒)先接种到甲培养基上,形成菌落后用无菌牙签挑取甲上的单个菌落,分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置上,一段时间后,菌落的生长状况如图所示。接种到甲培养基上的目的是筛选    的大肠杆菌,含有目的基因的大肠杆菌在乙、丙培养基上的存活状态分别是     ,    。

(1)(逆)反转录酶    DNA连接酶    CaCl2
(2)9      1/3
(3)含四环素抗性基因   在乙中不能存活    在丙中存活

解析试题分析:(1)过程②为逆转录,需要逆转录酶;过程④质粒和基因连接形成重组质粒。需要DNA连接酶发挥作用;⑤过程为转化,需要CaCl2使大肠杆菌处于易于吸收外界DNA的感受态。(2)PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ分3种酶分别用1,2,3表示,一种酶酶切时,一共可以得到3种不同长片段;两种酶酶切时,可得到1-2,2-1,2-3,3-2,1-3,3-1六种片段;三种酶酶切,可得到1-2,2-3,3-1三种片段,与前面重复,因此一种可形成9种片段,其中含有完整四环素抗性的有3种,单独用1酶切,单独用2酶切,1和2同时酶切得到的片段,占总数的1/3。(3)在甲中能生长的是具有四环素抗性的细菌,含有四环素抗性基因;目的基因插入氨苄青霉素基因后,破坏了该基因,使含有目的基因的大肠杆菌不能在含有氨苄青霉素的培养基上生长,但四环素基因是完好的,因此,含有目的基因的大肠杆菌能在含有四环素的培养基上生长。
考点:本题考查基因工程的操作等知识点,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识的网络结构。

练习册系列答案
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下图甲表示某生态系统中各成分之间的联系,图乙表示能量流经W种群所处营养级的示意图,请据图回答:

(1)①该生态系统有许多种动植物,其中鹭鸟等水禽就有多种,景色优美,陶冶情操,令人流连忘返,这体现了该生态系统的     价值。
②图甲中能构成群落的是     。若某地区因环境污染造成E中出现部分白化苗,对F、D数量的影响是      。
③图乙中的a、b表示的含义分别为:a     ,b      。
④图乙中,能量被W摄入量为m,其粪便量中能量为n,c中的能量为e,b的能量为f,则流入下一营养级的能量最多是      。
经调查,某生态系统中Y、X、Z分别位于第一、第二和第三营养级,每个营养级不同物种的个体数量如图丙所示(图中每一柱条代表一个物种)。一段时间后个体数量发生变化,结果如图丁所示。通过比较图丙和图丁可知,营养级的生物被捕食的压力明显增加。

(3)某种植物上栖息着一定数量的甲、乙两种昆虫和蜘蛛。甲、乙两种昆虫均以该植物为食,蜘蛛以乙昆虫为食。甲昆虫在白天活动,乙昆虫在夜晚活动。甲昆虫采食该种植物的叶片后,植物会释放出挥发性物质X,X既可吸引甲昆虫的天敌,也能驱赶乙昆虫。请回答:
若在上述植物上施用人工合成的物质X,短期内该植物上甲、乙昆虫天敌数量的变化是:
甲昆虫天敌数量  (增加、不变、减少);乙昆虫天敌数量   (增加、不变、减少)。

血糖浓度是调节胰素分泌的最重要因素。在持续高血糖刺激下,胰岛素的分泌可分为以下四个阶段:
第一阶段:血糖升高后,胰凫素分泌量立即增加,5min内可增加10倍,所释放的激素主要来源于胰岛B细胞内贮藏的激素。
第二阶段:5~15min内,胰岛素的分泌量逐渐下降。
第三阶段:15min后,胰岛素的分泌量再次增多,在2~3h达到高峰,并持续较长的时间,分泌速率也远大于第一阶段。这主要是胰凫素基因大量表达的结果。
第四阶段:倘若高血糖持续一周左右,胰凫素的分泌量还会进一步增加,这是由于长时间的高血糖刺激胰岛B细胞增殖所致。
请根据以上资料回答下列相关问题:
(1)第一阶段释放的激素主要是贮藏于胰岛B细胞内的激素。这些激素很可能贮藏于   (细胞器)中,首先分泌进入的内环境是       。
(2)胰岛素基因从来不在胰岛A细胞中表达,一种解释是胰岛A细胞中的胰岛素基因上游的相应序列已被修饰,以至于       不能识别和结合上去无法启动转录过程。
(3)在第三阶段胰岛素基因表达过程中,从细胞核来到细胞质中的物质是      ,从核糖体进入内质网的物质严格地说是     。
(4)当细胞完成一个细胞周期后,将可能有以下三种变化:①继续进入下一个细胞周期;②暂停分裂,但仍保留分裂能力;③停止分裂,分化成特定功能的细胞。胰岛B细胞最可能属于上述三种变化中的哪一类型?     (填序号)
(5)若某人患有自身免疫病,产生的抗体破坏了靶细胞表面的胰岛素受体,则与正常人相比,病人的胰岛素分泌量将      。
(6)已知胰岛B细胞的活动还受中枢神经系统的调控,则在反射弧的五个组成部分中,胰岛B细胞属于      。
(7)切除健康狗的胰脏,2天后狗出现糖尿病的一切症状。随后连续给其注射一定量溶于某种溶剂的胰岛素,发现其血糖含量恢复正常。由此推测:胰岛素能降低血糖的含量。为了证明这一推论。请写出该实验的对照组:                 。

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