题目内容
我国基因工程药物的研制和生产发展迅猛,下图是利用基因工程方法生产重组人生长激素的示意图。图中质粒表示基因工程中经常选用的载体—pBR322质粒,Ampr表示青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因。根据下图回答下列问题(限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ切割形成的末端均不相同):![]()
(1)过程②必需的酶是 ,过程④必需的酶是 。⑤过程中为提高成功率,常用 溶液处理大肠杆菌。
(2)如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ对质粒pBR322进行切割,用一种酶、两种酶和三种酶分别切割时,则形成的DNA片段共 种,其中含有完整四环素抗性基因的DNA片段的比例是 。
(3)如果只用限制酶PstI切割目的基因和质粒pBR322,完成过程④、⑤后,将三角瓶内的大肠杆菌(不含Ampr、Tetr抗性质粒)先接种到甲培养基上,形成菌落后用无菌牙签挑取甲上的单个菌落,分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置上,一段时间后,菌落的生长状况如图所示。接种到甲培养基上的目的是筛选 的大肠杆菌,含有目的基因的大肠杆菌在乙、丙培养基上的存活状态分别是 , 。
(1)(逆)反转录酶 DNA连接酶 CaCl2
(2)9 1/3
(3)含四环素抗性基因 在乙中不能存活 在丙中存活
解析试题分析:(1)过程②为逆转录,需要逆转录酶;过程④质粒和基因连接形成重组质粒。需要DNA连接酶发挥作用;⑤过程为转化,需要CaCl2使大肠杆菌处于易于吸收外界DNA的感受态。(2)PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ分3种酶分别用1,2,3表示,一种酶酶切时,一共可以得到3种不同长片段;两种酶酶切时,可得到1-2,2-1,2-3,3-2,1-3,3-1六种片段;三种酶酶切,可得到1-2,2-3,3-1三种片段,与前面重复,因此一种可形成9种片段,其中含有完整四环素抗性的有3种,单独用1酶切,单独用2酶切,1和2同时酶切得到的片段,占总数的1/3。(3)在甲中能生长的是具有四环素抗性的细菌,含有四环素抗性基因;目的基因插入氨苄青霉素基因后,破坏了该基因,使含有目的基因的大肠杆菌不能在含有氨苄青霉素的培养基上生长,但四环素基因是完好的,因此,含有目的基因的大肠杆菌能在含有四环素的培养基上生长。
考点:本题考查基因工程的操作等知识点,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识的网络结构。
大豆是两性花植物。 大豆子叶颜色(BB表现为深绿色;Bb表现为浅绿色;bb表现黄色,bb在幼苗阶段即死亡)和花叶病的抗性(由R、r基因控制)遗传的实验结果如下表:
| 杂交 组合 | 父本 | 母本 | F1的表现型及株数 | |||
| 深绿抗病 | 深绿不抗病 | 浅绿抗病 | 浅绿不抗病 | |||
| 一 | 浅绿抗病 | 深绿不抗病 | 220 | 0 | 217 | 0 |
| 二 | 浅绿抗病 | 深绿不抗病 | 110 | 109 | 108 | 113 |
(1)从上表杂交组合 可推断出抗病对不抗病性状是 (显、隐)性。
(2)这两对性状的遗传遵守基因的 定律。组合二中父本的基因型是 。
(3)如果用杂交组合一中的父本自交得到F1,则在F1的成熟植株中,浅绿抗病类型占 。
(4)有人想利用细菌的抗病毒基因对不抗病毒的大豆进行遗传改良,以获得抗病毒大豆品种。将外源抗病毒基因导入大豆,这项基因工程技术的核心步骤是 ,利用 技术可以获得大量的目的基因。
(5)上述的这种育种方法与传统的杂交育种方法相比,最显著的优点是 。