Question

7．回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制．此时，瓶壁上形成单层细胞，这种单层培养法的出现，对细胞培养的发展起了很大的推动作用．
（2）随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，但极少数细胞克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，朝着等同于癌细胞的方向发展，该种细胞由于细胞膜上糖蛋白减少，导致细胞间的黏着性降低
（3）在动物细胞体外培养过程中，一般要满足四个方面的条件：无菌、无毒的环境、营养、温度和pH和气体环境，其中在培养液中添加抗生素，以防培养过程中的污染；由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，故在使用合成培养基时，通常需加入血清、血浆等天然成分；气体环境主要是提供细胞所需的O₂和CO₂，其中O₂的作用是提供细胞进行有氧呼吸，CO₂的作用是维持培养液的pH．
（4）动物细胞培养可用于检测某种物质的毒性大小，若用被检测物质培养的细胞与对照组相比，发生变异的细胞数目所占的百分比大，则该物质的毒性大，判断的依据是物质的毒性越大，越容易导致细胞发生变异．

Answer 1

分析 1、动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养．2、动物细胞培养的条件：
（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物．
（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．
（3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4．
（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO₂（维持培养液的PH）．
3、动物细胞培养技术的应用：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究的各种细胞．

解答 解：（1）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制．
（2）随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，但极少数细胞克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，朝着等同于癌细胞的方向发展；癌细胞膜上糖蛋白减少，导致细胞间的黏着性降低，细胞易于扩散转移．
（3）在动物细胞体外培养过程中，一般要满足四个方面的条件：无菌、无毒的环境、营养、温度和pH和气体环境，其中在培养液中添加抗生素，以防培养过程中的污染；由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，故在使用合成培养基时，通常需加入血清、血浆等天然成分；气体环境主要是提供细胞所需的O₂和CO₂，其中O₂的作用是提供细胞进行有氧呼吸，CO₂的作用是维持培养液的pH．
（4）物质的毒性越大，越容易导致细胞发生变异，因此动物细胞培养可用于检测某种物质的毒性大小，若用被检测物质培养的细胞与对照组相比，发生变异的细胞数目所占的百分比大，则该物质的毒性大．
故答案为：
（1）接触抑制  
（2）不死性  糖蛋白 降低
（3）抗生素  血清、血浆  提供细胞进行有氧呼吸  维持培养液的pH
（4）物质的毒性越大，越容易导致细胞发生变异

点评 本题考查动物细胞培养的相关知识，要求考生识记动物细胞培养的过程、条件及相关应用，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．