Question

14．基因疫苗指的是DNA疫苗，即将编码外源性抗原的基因插入到质粒上，然后将质粒直接导入人或动物体内，让其在宿主细胞中表达出抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答．口蹄疫是一种危害严重的偶蹄动物传染病，近年来国内外在口蹄疫基因疫苗研究方面有了许多新的突破．
回答下列问题：
（1）将编码外源性抗原的基因插入到质粒上，此过程在基因工程中称作基因表达载体的构建，一般选受精卵作为受体细胞，将目的基因导入受体细胞常采用的方法是显微注射法．
（2）将导入目的基因的受体细胞在体外培养至桑椹胚或囊胚阶段后进行胚胎移植，选用的受体动物应符合的条件是雌性．
（3）欲检测人或动物体内是否具有了抗原蛋白，在分子水平上检测的方法是从转基因人或动物中提取蛋白质，进行抗原-抗体杂交．
（4）现已经通过基因工程和胚胎工程技术培育出一头具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛，可以采用细胞核技术形成一个重组细胞，再经早期胚胎培养技术获得具有口蹄疫免疫特性的多个胚胎，进而克隆出多头高产奶牛．

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与表达：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）将编码外源性抗原的基因插入到质粒上，此过程在基因工程中称作基因表达载体的构建．在动物基因工程中，一般选受精卵作为受体细胞，将目的基因导入受精卵常采用的方法是显微注射法．
（2）将导入目的基因的受体细胞在体外培养至桑椹胚或囊胚阶段后进行胚胎移植，此处需要的是高产奶牛，因此选用的受体动物应为雌性．
（3）欲检测人或动物体内是否具有了抗原蛋白，在分子水平上检测的方法是从转基因人或动物中提取蛋白质，进行抗原-抗体杂交．
（4）现已经通过基因工程和胚胎工程技术培育出一头具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛，可以采用细胞核技术形成一个重组细胞，再经早期胚胎培养技术获得具有口蹄疫免疫特性的多个胚胎，进而克隆出多头高产奶牛．
故答案为：
（1）基因表达载体的构建    受精卵    显微注射法
（2）桑椹胚或囊胚    雌性
（3）抗原-抗体杂交
（4）细胞核     早期胚胎培养

点评 本题考查基因工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记基因工程的具体步骤及相关细节；识记胚胎移植的基本程序；掌握目的基因检测与鉴定的方法，能结合所学的知识准确答题．