题目内容

干扰素具有抗病毒、抑制肿瘤及免疫调节等多种生物活性.将人干扰素基因导人家蚕细胞并大规模培养,可提取干扰素用于制药.
(1)干扰素的产生受细胞内基因的控制,通常处于抑制状态.在病毒刺激下,干扰素基因经
 
、翻译形成干扰素前体,进一步加工后形成成熟的干扰素,通过
 
方式分泌到细胞外.
(2)进行转基因操作前,需用
 
 酶短时处理幼蚕组织,以便获得单个细胞.
(3)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的
 
和
 
之间.
(4)某些干扰素可抑制肿瘤细胞DNA的合成,通过减慢细胞
 
分裂过程抑制肿瘤.还有些干扰素可提高吞噬细胞将抗原呈递给
 
细胞的能力,从而在免疫调节中发挥作用.
(5)利用生物反应器培养家蚕细胞时,贴壁生长的细胞会产生接触抑制.通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放人反应器中,这样可以
 
,增加培养的细胞数量,也有利于空气交换.
考点:基因工程的原理及技术
专题:
分析:1、基因工程技术的基本步骤:
(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成.
(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等.
(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法.
(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等.
2、动物细胞培养过程:取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中(原代培养)→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞,制成细胞悬液→转入培养液(传代培养)→放入二氧化碳培养箱培养.
解答: 解:(1)基因控制蛋白质合成包括转录和翻译两个重要过程;干扰素是一类糖蛋白,属于分泌蛋白,在核糖体上合成,经过内质网、高尔基体加工,最后由细胞膜以胞吐的方式将其分泌到细胞外.
(2)动物细胞培养时,需用用胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)处理动物组织,以便获得单个细胞.
(3)基因表达载体由启动子、标记基因、目的基因和终止子组成,其中启动子是RNA聚合酶识别与结合的部位,终止子是转录终止子的部位,因此为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的启动子和终止子之间.
(4)肿瘤细胞最大的特点是能无限增殖,其增殖方式是有丝分裂,干扰素能抑制DNA的复制来抑制肿瘤,同时提高了吞噬细胞将抗原呈递给T淋巴细胞的能力,从而在免疫调节中发挥作用.
(5)动物细胞培养时,由于贴壁生长的细胞会产生接触抑制,因此通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放人反应器中,这样可以扩大细胞贴壁生长的附着面积,增加培养的细胞数量,也有利于空气交换.
故答案为:
(1)转录    胞吐
(2)胰蛋白(或胶原蛋白)
(3)启动子    终止子
(4)有丝     T淋巴
(5)扩大细胞贴壁生长的附着面积
点评:本题综合考查基因工程、动物细胞培养和免疫的相关知识,要求考生识记基因工程的原理及操作步骤,掌握各步骤中需用注意的细节问题,了解基因工程技术的应用;识记动物细胞培养的具体过程;识记体液免疫和细胞免疫的具体过程,能结合所学的知识准确答题.
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