题目内容
【题目】取同种生物的不同类型细胞,检测其基因表达,结果如图1,回答下列相关问题.
(1)基因1~8中有一个是控制核糖体蛋白质合成的基因,则该基因最有可能是基因_____。
(2)图所示细胞中功能最为近似的是细胞_____。
A.1与6 B.2与5C.2与3D.4与5
(3)判断图中细胞功能近似程度的依据是_____
(4)如图2为三种质粒和一个含目的基因的片段的示意图.图中Ap为氨苄青霉素抗性基因,Tc为四环素抗性基因,lacZ为蓝色显色基因,EcoRⅠ(0.7Kb)、PvuⅠ(0.8Kb)等为限制酶及其切割的位点与复制原点的距离,1Kb=1000个碱基对长度.请据图回答:
①质粒A、C不能作为目的基因运载体的理由分别是_____、_____.
②将图中的目的基因与质粒B进行重组,需要用到_____酶.如果是两两重组,可能有_____种长度的重组结果。
③在基因工程实验的过程中,检查目的基因是否重组到质粒中,也是一个重要的一步.现使用_____酶切重组质粒,完全酶切后,进行电泳检测.若电泳图谱中出现长度为1.1kb和_____kb,或者_____kb和_____kb的片段,则基本上可以判断该重组质粒已与目的基因重组成功(重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRⅠ的识别位点之间的碱基对忽略不计)。
④下列关于基因工程常用运载体﹣﹣质粒的说法正确的是_____。
A.质粒通常是来自于细菌的环状DNA分子,使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解
B.质粒运载体只能在与目的基因重组后进入细胞
C.质粒上具有多种限制酶切点,以便于切割后与目的基因连接.没有限制酶就无法使用质粒运载体
D.质粒运载体的复制和表达也遵循中心法则
【答案】2 A 表达的相同基因最多,表达的差异基因最少 缺少标记基因 复制原点被限制酶切割 限制酶(PvuⅠ)和DNA连接酶 3 EcoRⅠ酶 5.6 3.1 3.6 ACD
【解析】
分析图1:图1表示7种细胞中8种基因的表达情况,不同细胞选择表达的基因种类有区别,其中2号基因在7种细胞中均表达;1号和6号细胞表达的基因最为相似。分析图2:图2表示三种质粒和一个含目的基因的片段的示意图,图中Ap为氨苄青霉素抗性基因,Tc为四环素抗性基因,lacZ为蓝色显色基因,EcoRⅠ(0.7Kb)、PvuⅠ(0.8Kb)等为限制酶及其切割的位点与复制原点的距离。目的基因在与运载体相连时要保证重组质粒上含有标记基因,以便于筛选导入了重组质粒的受体细胞。
(1)几乎所有细胞都含有核糖体,所以控制核糖体合成的基因几乎在所有细胞都表达,因此基因1~8中,2基因最可能是控制核糖体蛋白质合成的基因。
(2)1和6细胞表达的基因最为相似,所以1和6细胞功能最为近似,即A正确,BCD错误。
(3)1和6细胞表达的相同基因最多,表达的差异基因最少,所以两者功能最为近似。
(4)①由图可知,质粒A中缺少标记基因,质粒C中的复制原点被酶切割,所以A、C不能作为运载体。
②由图可知,获取目的基因使用的限制酶是PvuⅠ,所以切割质粒B也用该限制酶,同时目的基因与运载体连接的时候还需要DNA连接酶。用DNA连接酶连接时,可能出现质粒环化、目的基因环化、形成重组质粒共3种长度的结果。
③质粒长度为2.7kb,目的基因长度为4.0kb,所以重组质粒长度为6.7kb,出现长度为1.1kb,则使用EcoRⅠ酶切割的,另一个长度为5.6kb,若目的基因重组时倒置,可形成3.1kb和3.6kb的片段。
④A、质粒通常是来自于细菌的环状DNA分子,使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解,A正确;
B、质粒运载体自身也能进入细胞,B错误;
C、质粒上具有多种限制酶切点,以便于切割后与目的基因连接。没有限制酶就无法使用质粒运载体,C正确;
D、质粒运载体的复制和表达也遵循中心法则,D正确。
故选ACD。