题目内容

【题目】利用微生物分解玉米淀粉来生产糖浆具有广阔的应用前景。现有的野生菌株对玉米淀粉的分解效率低,某同学尝试对其进行改造,以获得高效菌株。请回答下列问题:

(1)实验步骤:

①配制固体培养基,该培养基的碳源应为___________;除碳源外,培养基中还应包括___________等物质。

②用适当强度的紫外线照射野生菌株,其目的是______________________。将经照射的野生菌株接种至已灭菌的培养基平板上,培养基的灭菌方法为___________。

③将平板放在适宜条件的培养箱中培养,平板应___________(填“正置”或“倒置”)。

④菌落形成后,加入碘液,观察菌落周围的透明圈,___________的菌落就为初选菌落。

(2)采用平板划线法接种时,为获得单个菌落,在划线时应进行的操作是___________。

(3)选择出来的细菌经扩大培养后需要进行计数,采用稀释涂布平板法计数时是否需要设置空白对照组?___________;解释其原因:___________。

【答案】(玉米)淀粉 氮源、水和无机盐 诱导野生菌株发生基因突变 高压蒸汽灭菌法 倒置 透明圈大 在第二次及以后的划线时,应从上一次划线的末端开始划线 需要 需要证明(或判断)培养基是否被杂菌污染(或培养基灭菌是否合格)

【解析】

微生物培养时所用培养基的营养物质应包含碳源、氮源、水和无机盐,选择培养基是指通过培养混合的微生物,仅得到或筛选出所需要的微生物,其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的,通常通过氮源、碳源的添加达到选择效果,选择培养基中可以加有能与目的菌的无色代谢产物或反应物发生显色反应的指示剂,从而达到找出目的菌菌落并挑选分解能力强的菌落的目的。培养基采用高压蒸汽灭菌法灭菌,在灭菌后还应该以空白培养基作对照以判断是否灭菌完全,未被污染。采用平板划线法分离微生物,在操作时,接种环通过灭菌,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线,末端划线就起了稀释作用。这样做的目的是为了得到单菌落。

(1)该培养基是为了分离能高效分解淀粉的微生物,故碳源应该为(玉米)淀粉。除碳源外,还应当加入氮源、水和无机盐。紫外线照射可以诱导野生菌株发生基因突变,以获取所需菌种。培养基的灭菌方法为高压蒸汽灭菌法。在培养箱中的平板应倒置,以防止皿盖上的水珠滴入培养基中造成污染。淀粉遇碘变为蓝色,能够分解淀粉的菌落周围会形成透明圈,故应选择透明圈大的菌落作为初选菌落;

(2)采用平板划线法接种时,在第二次及以后的划线时,应从上一次划线的末端开始划线,这样可以获得单个菌落;

(3)用于培养细菌的培养基可能灭菌不合格,被杂菌污染,从而影响计数结果,因此,要判断培养基是否被污染,需要将空白培养基放在相同条件下培养作为对照。

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