题目内容
【题目】抗菌肽是一类由昆虫产生的多肽，同时具备抗霉菌、广谱杀菌、抑制病毒、抑杀肿瘤细胞等多重功能。目前已获得具有转抗菌肽基因的转基因动、植物，均具有较高抗病性。
（1）构建基因表达载体的过程中使用的两种工具酶是_______。质粒作为常用的运载体，应具备的基本条件有_____________（写出两点即可） 。若重组质粒如图甲所示，抗菌肽能否正常表达______ ，原因是_________。
（2）选用抗菌肽PR39基因培育转基因小鼠时，应将重组质粒导入______细胞；通过________，可直接证明转基因小鼠对细菌的抵抗力。
（3）选用抗菌肽PR39基因培育转基因植物时，应将重组质粒导入其______细胞，再通过______技术快速繁殖转基因植物。此过程中，通过调节_______ 激素的配比诱导其脱分化与再分化过程。
【答案】 限制性核酸内切酶（限制性酶）、DNA连接酶 能够自我复制、具有标记基因、具有一个至多个限制酶切割位点、需具有启动子和终止子等 否 图中目的基因插入在启动子的上游，无法开始转录 受精卵 人工细菌感染，比较转 PR39 基因小鼠与野生型小鼠之间的抗菌能力的差异 （正常）体 植物组织培养 生长素与细胞分裂素
【解析】试题分析：据图分析，图示为基因表达载体，其含有的成分有目的基因、启动子、终止子和复制原点；目的基因插入的位置不在启动子与终止子之间，因此该目的基因不能表达；该基因表达载体没有标记基因，不能检测目的基因是否导入受体细胞。
（1）基因工程中，常用的工具酶是限制酶和DNA连接酶；质粒作为运载体，必须具备的条件是：能够自我复制、具有标记基因、具有一个至多个限制酶切割位点、需具有启动子和终止子等。根据以上分析已知，该基因表达载体上的目的基因不能正常表达，因为图中目的基因插入在启动子的上游，无法开始转录。
（2）选用抗菌肽PR39基因培育转基因小鼠时，一般将重组质粒导入受精卵；通过人工细菌感染，比较转 PR39 基因小鼠与野生型小鼠之间的抗菌能力的差异，可直接证明转基因小鼠对细菌的抵抗力。
（3）选用抗菌肽PR39基因培育转基因植物时，一般将重组质粒导入其体细胞，再通过植物组织培养技术快速繁殖转基因植物。此过程中，通过调节生长素与细胞分裂素激素的配比诱导其脱分化与再分化过程。
