Question

3．下列有关基因工程及其应用的说法中，正确的是（　　）

• A． 可用限制酶切割烟草花叶病毒的核酸
• B． 必须用相同限制酶处理目的基因和运载体
• C． DNA连接酶连接DNA片段形成磷酸二酯键
• D． 运载体上必须要有标记基因，用于筛选

Answer 1

分析 1、限制酶：主要从原核生物中分离纯化出来．特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．形成黏性末端和平末端两种．
（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来．
（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．
（3）结果：形成黏性末端或平末端．
2、DNA连接酶：
（1）根据酶的来源不同分为两类：E．coliDNA连接酶、T₄DNA连接酶．这二者都能连接黏性末端，此外T₄DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低．
（2）DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键．
（3）DNA连接酶和DNA聚合酶的区别：
①DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯键；
②DNA连接酶是同时连接双链的切口，而DNA聚合酶只是在单链上将一个个脱氧核苷酸连接起来；
③DNA连接酶不需要模板，而DNA聚合酶需要模板
3、运载体：
（1）常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒．（质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子．）
（2）作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点； ②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选；③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来．

解答 解：A、限制酶能特异性切割DNA分子，而烟草花叶病毒的核酸是RNA，A错误；
B、一般用相同限制酶处理含有目的基因的外源DNA分子和运载体，以便形成相同的黏性末端，若两种限制酶切割形成的突出部分的碱基序列相同，则也可以用这两种不同的限制酶切割，B错误；
C、DNA连接酶连接DNA片段形成磷酸二酯键，C正确；
D、运载体上必须要有标记基因，用于筛选，D正确．
故选：CD．

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤，掌握各操作工具的特点及作用，能结合所学的知识准确判断各选项．