题目内容
【题目】下图为细胞融合技术的相关过程,请分析并回答下列问题:
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(1)若A、B细胞为植物细胞,在进行体细胞杂交之前,必须先利用__________________去除细胞壁,细胞融合完成的标志是____________________________________;
(2)若上图是制备单克隆抗体的过程,从A、B细胞到C细胞的过程中,所形成的C有____种,用特定的选择性培养基筛选后得到的D细胞应该是_____________________, D细胞还需进行_____________________________________,就可获得能够分泌所需抗体的细胞。
(3)若A、B细胞分别来自染色体数目相同的甲、乙两种二倍体药用植物,若A、B细胞杂交后获得的杂种植株是可育的,而甲乙有性杂交的后代是不育的,造成这种差异的原因是__________________________。
【答案】纤维素酶和果胶酶 杂种细胞生出新的细胞壁 3 融合的杂交瘤细胞 克隆化培养和专一抗体检测 在减数分裂过程中,前者染色体联会正常,而后者染色体联会异常(紊乱),不能产生正常的生殖细胞
【解析】
1、植物体细胞杂交:来自两个不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞(植物体细胞杂交技术),并把杂种细胞培育成植株(植物组织培养技术)。
(1)去细胞壁的方法:酶解法,即在温和的条件下用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。
(2)诱导植物细胞融合的方法:物理法:离心、振动、电激;化学法:聚乙二醇(PEG).
(3)原生质体能融合的原因:细胞膜具有一定的流动性.
(4)融合完成的标志:再生出新的细胞壁(与细胞内高尔基体有重要的关系)。
2、动物细胞融合是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。常用的诱导因素有电激、聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒等。幼龄动物的组织或胚胎细胞分裂能力强,所以常选这些细胞。灭活的病毒促融是生物方法,是动物细胞促融的特有方法。
3、单克隆抗体是由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。
(1)细胞来源有B淋巴细胞:能产生特异性抗体,在体外不能无限繁殖;骨髓瘤细胞:不产生专一性抗体,体外能无限繁殖。
(2)杂交瘤细胞的特点:既能大量增殖,又能产生特异性抗体。单克隆抗体的优点:特异性强、灵敏度高,并可能大量制备。
(1)若A、B细胞为植物细胞,在进行体细胞杂交之前,必须先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁,细胞融合完成的标志是杂种细胞生出新的细胞壁。
(2)若上图是制备单克隆抗体的过程,从A、B细胞到C细胞的过程中,所形成的C有A和A细胞的融合体、B和B细胞的融合体、A和B细胞的融合体共3种类型,用特定的选择性培养基可抑制自体细胞的融合体的生长,经筛选后得到的D细胞是A和B融合的杂交瘤细胞,由于不同的浆细胞产生的抗体种类不同,所以D细胞还需进行克隆化培养和专一抗体检测,就可获得能够分泌所需抗体的细胞。
(3)甲和乙是两种二倍体植物,存在生殖隔离,若A、B细胞杂交后获得的杂种植株含有同源染色体,所以是可育的,而甲乙有性杂交的后代不含同源染色体,是不育的,即造成这种差异的原因是在减数分裂过程中,前者染色体联会正常,而后者染色体联会异常(紊乱),不能产生正常的生殖细胞。
【题目】Hedgehog基因(H)广泛存在于无脊椎动物和脊椎动物中,在胚胎发育中起重要作用.我国科研工作者利用基因敲除和核酸分子杂交技术研究了H基因在文昌鱼胚胎发育中的作用.
(1)在脊椎动物各个不同类群中,H基因的序列高度相似.H基因高度保守,是由于该基因的突变类型在_______________________中被淘汰.
(2)研究者使用了两种TALE蛋白对文昌鱼的H基因进行敲除.TALE蛋白的结构是人工设计的,蛋白质的中央区能够结合H基因上特定的序列,F区则能在该序列处将DNA双链切开,如图1所示.
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①根据TALE蛋白的功能设计出其氨基酸序列,再根据氨基酸序列对应的___________序列推测出编码TALE蛋白的DNA序列,人工合成DNA序列之后再以其为模板进行______生成mRNA.
②将两种mRNA用_____________法导入文昌鱼的卵细胞中,然后滴加精液使卵受精.此受精卵发育成的个体为F0代.
③F0代个体细胞内被两种TALE蛋白处理过的DNA重新连接后,H基因很可能因发生碱基对的__而丧失功能,基因丧失功能则被称为“敲除”.
(3)提取F0代胚胎细胞DNA,克隆H基因,用________进行切割,电泳后用放射性同位素标记的H基因片段为探针进行DNA分子杂交,实验结果如图2所示.图中样品_____代表的F0个体中部分H基因已被敲除.研究者发现,在F0个体产生的所有配子中,通常只有部分配子的H基因被敲除,可能的原因是__________________________________.
(4)将F0代与野生型鱼杂交,再从F1代鱼中筛选出某些个体相互交配,在F2代幼体发育至神经胚期时进行观察和计数,结果如表所示.
F2中正常幼体数 | F2中畸形(无口和鳃,尾部弯曲)幼体数 | |
第一组 | 101 | 29 |
第二组 | 106 | 33 |
第三组 | 98 | 31 |
根据杂交实验结果可知,F1代鱼中筛选出的个体均为____________(杂合子/纯合子),H基因的遗传符合___________定律.随着幼体继续发育,进一步检测到的各组中正常个体数与畸形个体数的比例将会____________.