Question

化学降解法是一种传统的测定DNA分子碱基序列的方法，具体操作过程如图：

（1）由待测序的DNA片段获得DNA单链的方法是

 

，图中特定化学试剂的作用是破坏DNA单链在某种特定碱基处的

 

键．
（2）电泳时，电泳槽内先要加入

 

，再将处理好的不同长度的DNA片段样品加入点样孔，利用待分离样品中各分子的带电性质，以及分子

 

、形状的不同，使它们在电场作用下产生不同的

 

，从而实现样品中各分子的分离和鉴定．
（3）从理论上分析，要想测出图中该DNA片段的全部碱基序列，按以上模式操作至少

 

次．
（4）若想进一步判定该DNA片段中是否含有某基因，可用基因探针检测．探针的制备是取某基因的

 

条链，并作

 

．

Answer 1

考点：用DNA片段进行PCR扩增

专题：

分析：分析题图：图示是测定DNA片段中胞嘧啶位置的过程示意图，①用特制的化学剂破坏胞嘧啶脱氧核苷酸，产生一组由各种不同长度的DNA链组成的混合物；②将上述混合物经凝胶电泳处理，将不同长度的DNA链按大小分离；③再经放射自显影后，根据X光底片上所显现的相应谱带，测定DNA片段中胞嘧啶的位置．

解答： 解：（1）由DNA片段获得DNA单链的方法可用解旋酶或高温处理待测DNA片段，使其解旋，图中特定化学试剂的作用是破坏DNA单链的胞嘧啶脱氧核苷酸，在某种特定碱基处的磷酸二酯键，使其断裂，产生一组由各种不同长度的DNA链组成的混合物．
（2）电泳时，电泳槽内先要加入缓冲液，再将处理好的不同长度的DNA片段样品加入点样孔，利用待分离样品中各分子的带电性质，以及分子（本身）大小、形状的不同，使它们在电场作用下产生不同的 迁移速度，从而实现样品中各分子的分离和鉴定．
（3）因每次只能确定一种碱基的相应序列，故从理论上分析，要想测出图中该DNA片段的全部碱基序列，按以上模式操作至少3次．
（4）基因探针为一段带有放射性标记的DNA序列．探针的制备是取某基因的一条链，并作放射性同位素标记．
故答案为：
（1）用解旋酶（或95℃高温）处理待测DNA片段     磷酸二酯
（2）缓冲液       （本身）大小     迁移速度
（3）三
（4）一     放射性同位素标记

点评：本题考查DNA分子的结构及根据图示进行实验分析，意在考查 意在考查能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系、能用文字、图表以及数学方式等多种表达形式准确地描述生物学方面的内容及能从课外材料中获取相关的生物学信息，并能运用这些信息，结合所学知识解决相关的生物学问题的能力．