Question

【题目】[生物——选修1：生物技术实践]

人们使用含三丁基锡、三苯基锡等有机锡化合物的油漆涂于船只、海洋建筑物等的表面，有效防止了海洋生物附着生长，但近年来的研究发现油漆中的有机锡可释放入海，对多种生物造成毒害。现欲从海洋底泥中分离分解三丁基锡的微生物。回答下列问题：

（1）为了获得能降解三丁基锡的微生物菌种，可在被三丁基锡污染的海洋底泥中取样，并应选用以 为碳源的培养基进行选择培养。除含有碳源外，培养基还应含有 、 、无机盐和蒸馏水等。

（2）实验过程中，玻璃器皿和金属用具可以采用干热灭菌法来灭菌，原因是 。

（3）常用的微生物接种方法有两种，但只有 可用于微生物的计数，运用该方法计数的结果往往比实际数目 （填“高”或“低”）。在平板划线操作中，接种环在使用前要先灼烧，其目的是 ，第二次及其后的划线都要从上一次划线的末端开始，其目的是 。

（4）将获得的3种待选微生物甲、乙、丙分别接种在含少量三丁基锡的相同培养液中培养（培养液中其他营养物质充裕、条件适宜），观测从实验开始到微生物停止生长所用的时间，甲、乙、丙分别为33小时、15小时、46小时，则应选择微生物_______作为菌种进行后续培养。

Answer 1

【答案】

（1）三丁基锡；氮源；琼脂

（2）玻璃器皿和金属用具能耐高温，且要保持干燥

（3）稀释涂布平板法；低；杀灭接种环上的微生物，使微生物数目能够随着划线次数的增加而逐步减少，以达到分离的效果

（4）乙

【解析】

（1）本实验为分离分解三丁基锡的微生物，培养基的碳源应为三丁基锡。培养基的成分一般包括碳源、氮源、水分、无机盐等，选择培养基一般为固体培养基，培养基中应含有琼脂。

（2）干热灭菌法适用于能耐高温，需保持干燥物品，玻璃器皿和金属器皿符合该条件。

（3）重要的微生物接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，前者只能用于分离微生物，后者不仅能分离微生物还能计数；稀释涂布平板法计数是根据菌落数目表示微生物数目，菌落有可能是两个微生物或多个共同发育而来，导致菌落数目小于微生物数目；灼烧是接种环常用灭菌方法；上次划线的末端微生物数目少，通过划线能进一步降低微生物的数目，达到分离的目的。

（4）根据停止生长的时间，乙需要时间最短，说明其分解三丁基锡的能力最强。

项目	条件	结果	常用方法	应用范围
消 毒	较为温和的物理或化学方法	仅杀死物体表面或内部的部分对人体有害的微生物	煮沸消毒法	日常用品
			巴氏消毒法	不耐高温的液体
			化学药剂消毒法	用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源
灭 菌	强烈的理化因素	杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子	灼烧灭菌法	接种工具
			干热灭菌法	玻璃器皿、 金属工具
			高压蒸汽 灭菌法	培养基及容 器的灭菌