Question

6．在农业生产研究上，常常需要进行微生物的培养和计数．
（1）如图是利用平板划线法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面．
（2）分析下面培养基的配方：NaNO₃、KH₂PO₄、NaH₂PO₄、MgSO₄7H₂O、KC1、H₂O．若此培养基用于培养分解尿素的细菌，则应除去上述成分中的NaNO₃，并加入尿素和葡萄糖，以补充碳源和氮源．
（3）用稀释涂布平板法测定同一土壤样品巾细菌数量．若在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为233，那么每毫升样品中的菌落数是1.165×10⁹、涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL）．
（4）某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株．在筛选过程中应将土壤样品稀释液接种于以原油为唯一碳源的培养基上．从功能上讲，该培养基属于选择培养基；从物理状态上看该培养基属于培养基．为了筛选出高效菌株，应该比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力强．

Answer 1

分析 微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法．若要对微生物进行取样计数，接种方法只能是稀释涂布平板法．稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养．培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐．

解答 解：（1）由图可知，其采取的是平板划线法，该方法能把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面．
（2）培养分解尿素的细菌，其氮源是尿素，所以培养基中要除去含氮物质，即去除NaNO₃，并加入尿素和葡萄糖，以提供氮源和碳源．
（3）在稀释倍数为10⁶的培养基中测得平板上菌落数的平均值为233，那么每毫升样品（涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL） 中的菌落数是=10⁵×233×$\frac{1}{2}$=1.165×10⁹个．
（4）筛选出能高效降解原油的菌株需要使用以原油为唯一碳源的选择培养基，从物理状态上看该培养基属于固体培养基，为了筛选出高效菌株，应该比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力强．
故答案为：
（1）平板划线    稀释
（2）NaNO₃    尿素和葡萄糖   
（3）1.165×10⁹
（4）原油    选择   固体   强

点评 本题考查微生物的分离和培养、测定某种微生物的数量等知识，要求考生识记培养基的成分和微生物的接种方法，并能准确判断图中的接种方法；能采用稀释涂布平板法对微生物进行计数，并能对实验结果进行分析和简单的计算．