题目内容
【题目】科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗,其技术流程如图1。图2表示目的基因及限制酶切点,图3表示质粒,据图回答:
![]()
![]()
(1)重组细胞的细胞核来自______________细胞。
(2)将基因导入ES细胞而不是导入上皮细胞是因为ES细胞具有______________。
(3)步骤③,需要构建含有干扰素基因______________。
(4)从基因组数据库中查询干扰素基因的核苷酸序列,以便根据真训练设计合成引物用于PCR扩增,PCR扩增过程至少第____________轮循环后才能获得纯目的基因片段(仅含引物之间的序列)。
(5)对于干扰素基因片段和质粒进行双酶切时,可选用限制酶的组合为____________或____________。
(6)将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察,选择发___________色荧光的细胞进行体外诱导。为检测干扰素基因是否表达,可以采用___________的方法。
【答案】(1)(干扰素基因缺失小鼠的)上皮细胞 (2)全能性 (3)基因表达载体
(4)3(2分) (5)HindIII和PstI EcoRI和PstI (6)绿 抗原—抗体杂交
【解析】
试题分析::(1)重组细胞的细胞核来自上皮细胞
(2)将基因导入ES细胞而不是导入到上皮细胞是因为ES细胞具有全能性.
(3)步骤③是将目的基因导入ES细胞,该过程之前需要构建基因表达载体;
(4)因为前两轮循环扩增产物上目的基因上都带有模板DNA其他片段,即扩增产物比目的基因的DNA片段长,第三轮就有了纯目的基因片段了
(5)由图可知,SamⅠ酶的识别序列和切割位点位于目的基因上,用该酶切割会破坏目的基因,因此对干扰素基因片段和质粒进行酶切时,可选用限制酶HindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ
(6)用限制酶HindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ切割时会破坏红色荧光蛋白基因,但不会破坏绿色荧光蛋白基因,因此将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察,选择发绿色荧光的细胞进行体外诱导.为检测干扰素基因是否表达,可以采用抗原-抗体杂交法
【题目】科研人员发现轮叶黑藻高密度水域中浮游藻类很少。有人对此作了如下研究:
第一步:先制备轮叶黑藻浸提液备用。
第二步:往标号的6只烧瓶分别添加湖水水样300mL;在往1、2、3号瓶各加入30mL蒸馏水,4、5、6号瓶各加入30mL轮叶黑藻浸提液。
第三步:在相同且适宜的条件下培养,分别与第2、4、6天测量各瓶中浮游藻类生物量(用叶绿素a含量表示,单位mg/L),记录如下表:
烧瓶 | 2天 | 4天 | 6天 | |||
叶绿素a含量 | 叶绿素a平均含量 | 叶绿素a含量 | 叶绿素a平均含量 | 叶绿素a含量 | 叶绿素a平均含量 | |
1 | 2.10 | 2.00 | 2.40 | 2.40 | 2.58 | 2.60 |
2 | 1.98 | 2.39 | 2.59 | |||
3 | 1.92 | 2.41 | 2.63 | |||
4 | 1.50 | 1.60 | 1.20 | 1.20 | 0.51 | 0.52 |
5 | 1.60 | 1.30 | 0.55 | |||
6 | 1.70 | 1.10 | 0.50 | |||
根据实验回答下列问题:
(1)实验对照组是___________号瓶。
(2)实验自变量是___________,因变量是___________,无关变量主要有___________。
(3)将沥干并烘干的浮游藻类加入适量二氧化硅、碳酸钙、无水乙醇,快速研磨后过滤,此操作目的是_____________。
(4)请在坐标系中进一步完成直方图。
(轮叶黑藻对于混合藻类的抑制率=(1-
)×100%)
![]()