Question

19．科研人员为了分离、筛选蓝莓果酒专用酵母来改善蓝霉果酒的品质，进行了如下实验：
①取不同品种成熟蓝莓制果浆，置于恒温培养箱中自然发酵至产生大量气泡和明显酒味．
②将蓝莓发酵液梯度稀释后，进行涂布平板操作，每个浓度梯度3个平板，并在恒温下培养2d，根据酵母菌菌落特征挑取单菌落．
③将挑取的单菌落扩大培养后，通过平板划线法分离纯化并保存．
④检测筛选菌株的发酵性能，得到如下实验结果．

品种	乙醇体积分数/%					pH
	8%	10%	12%	14%	15%	4.00	2.98	2.03	1.48
葡萄酿酒酵母	++++	++++	+	-	-	++++	++++	-	-
BL-21	++++	+++	+	-	-	++++	++++	-	-
BF-09	++++	++++	++	-	-	++++	++++	+	-
BF-17	++++	++++	++	+	-	++++	++++	++	-

注“-”表示不产气；“+”表示产气越多产气越多．
请分析回答：
（1）步骤①恒温培养箱的温度控制在20°C左右，其主要目的是使酵母菌细胞快速生长、繁殖．
（2）步骤②中，发酵液应使用无菌水进行梯度稀释．稀释涂布平板法依据的原理是在稀释度足够高的菌液里，将聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落．
（3）配制培养某的丰要步骤是：计算-称量-溶化-灭菌-倒平板．在接种前，随机取 若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是检测培养基平板灭菌是否合格．
（4）步骤③平板划线时，常用的工具是接种环，对接种环的处理要求是每次划线前后都要用灼烧法对接种环进行灼烧灭菌．
（5）固体焙养某常用琼脂作凝固剂，理想的凝固剂应具有的特点是BDE（多选）．
A．含有某些特殊的营养物质
B．消毒灭菌不会改变其特性
C．能被微生物分解和利用    
D．微生物生长温度范围内保持固体状态
E．配制方便且有良好的透明性
（6）根据实验结果推知，BF-17（品种）是较理想的酿酒菌种．

Answer 1

分析 1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型．果酒制作的原理：
（1）在有氧条件下，反应式如下：C₆H₁₂O₆+6H₂O+6O₂$\stackrel{酶}{→}$6CO₂+12H₂O+能量；            
（2）在无氧条件下，反应式如下：C₆H₁₂O₆$\stackrel{酶}{→}$2CO₂+2C₂H₅OH+能量．
2、稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面，进行培养；在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落．

解答 解：（1）酵母菌生长的适宜温度是18-25℃，所以步骤①恒温培养箱的温度控制在20℃左右，目的是为酵母菌细胞生长、繁殖提供适宜的温度．
（2）步骤②中，发酵液应使用无菌水进行梯度稀释．稀释涂布平板法依据的原理是在稀释度足够高的菌液里，将聚集在一起的菌种分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落．
（3）配制培养某的丰要步骤是：计算-称量-溶化-灭菌-倒平板．在接种前，随机取 若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是检测培养基平板灭菌是否合格．
（4）步骤③平板划线时，常用的工具是接种环，对接种环的处理要求是每次划线前后都要用灼烧法对接种环进行灼烧灭菌．
（5）固体焙养某常用琼脂作凝固剂，理想的凝固剂应具有的特点是消毒灭菌不会改变其特性、微生物生长温度范围内保持固体状态、配制方便且有良好的透明性．故选：BDE．
（6）根据题意和图表分析可知：品种BF-17是较理想的酿酒菌种．
故答案为：
（1）20°C      使酵母菌细胞快速生长、繁殖
（2）无菌水      在稀释度足够高的菌液里，将聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落
（3）灭菌          检测培养基平板灭菌是否合格
（4）每次划线前后都要用灼烧法对接种环进行灼烧灭菌
（5）BDE
（6）BF-17

点评 本题考查果酒的制作的相关知识，要求考生识记参与果酒制作的微生物及其代谢类型，掌握果酒制作的原理及操作条件，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．