Question

15．请根据所学知识，回答下列问题．
（1）硝化细菌纯化并计数时，对照组应该涂布等量的无菌水．若实验组每个平板中的菌落数都超过了300，应对样本菌液进行适当的稀释处理．
（2）在胡萝卜素的提取过程中，首先要对新鲜的胡萝卜进行干燥（粉碎和干燥），但要注意控制温度和时间．根据胡萝卜素的特点，可以考虑使用萃取的方法提取．
（3）将提取的胡萝卜素粗品通过纸层析法进行鉴定，观察结果时会发现标准样品位于展开剂前沿，萃取样品往往比标准样品多出现一条层析带，其原因是胡萝卜素粗品中含有其他色素（或杂质）．在必修中“叶绿体中色素的提取和分离”的实验中也用到了类似的方法，目的是分离叶绿体中色素．

Answer 1

分析 1、统计菌落数目的方法
（1）显微镜直接计数法
 ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数； ③缺点：不能区分死菌与活菌．
（2）间接计数法（活菌计数法）
 ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌．通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌．
②操作
a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性．
b、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数．
③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数．
2、植物芳香油的提取方法：蒸馏法、压榨法和萃取等．
（1）蒸馏法：芳香油具有挥发性．把含有芳香油的花、叶等放入水中加热，水蒸气能将挥发性较强的芳香油携带出来，形成油水混合物；冷却后，油水混合物又会重新分成油层和水层，除去水层便得到芳香油，这种提取方法叫蒸馏法．
根据蒸馏过程中原料放置的位置的标准，将水蒸气蒸馏法划分为水中蒸馏、水上蒸馏和水气蒸馏．
（2）萃取法：这种方法需要将新鲜的香花等植物材料浸泡在乙醚、石油醚等低沸点的有机溶剂中，使芳香油充分溶解，然后蒸去低沸点的溶剂，剩下的就是芳香油．
（3）压榨法：在橘子、柠檬、甜橙等植物的果皮中，芳香油的含量较多，可以用机械压力直接榨出，这种提取方法叫压榨法．

解答 解：（1）硝化细菌纯化并计数时，对照组应该涂布等量的无菌水．实验组每个平板中的菌落数都超过了300，说明菌液浓度过大，需要进行适当的稀释处理．
（2）新鲜的胡萝卜含有大量的水分，在胡萝卜素的提取过程中，要对新鲜的胡萝卜进行干燥（粉碎和干燥），但要注意控制温度和时间，这是因为温度过高会导致胡萝卜素分解．胡萝卜素的化学性质稳定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等脂溶性有机溶剂，因此可以考虑使用萃取的方法提取．
（3）将提取的胡萝卜素粗品通过纸层析法进行鉴定，观察结果时会发现标准样品位于展开剂前沿，萃取样品往往比标准样品多出现一条层析带，其原因是胡萝卜素粗品中含有其他色素（或杂质）．在必修中“叶绿体中色素的提取和分离”的实验中用到了纸层析法，目的是分离叶绿体中色素．
故答案为：
（1）无菌水    适当的稀释
（2）干燥（粉碎和干燥）　温度　　萃取
（3）纸层析   胡萝卜素粗品中含有其他色素（或杂质）　 分离叶绿体中色素

点评 本题考查微生物的计数、从生物材料中提取某些特定成分，要求考生识记微生物计数的方法；识记从生物材料中提取某些特定成分的方法，能结合所学的知识准确答题．