Question

分析回答下列有关生物技术实践方面的问题：
（一）微生物的培养技术在工农业、医疗卫生等领域有着广泛的应用．表为某微生物培养基的配方，请回答：

成    分	含     量
NaNO3	3g
K2HPO4	1g
KCl	0.5g
MgSO4?7H2O	0.5g
FeSO4	0.01g
（CH2O）	30g
H2O	1 000ml
青霉素	0.1万单位

（1）依用途划分，该培养基属于

 

培养基．
（2）根据培养基的成分，推测所培养的微生物可能是

 

A．尿素分解菌   B．霉菌或酵母菌    C．病毒     D．蓝藻
（3）配制培养基时，在各成分溶化后分装前，需要做的工作是

 

．如果要鉴别自来水中大肠杆菌是否超标，至少还要加入琼脂和伊红-美蓝，并且除去

 

．
（4）若要通过稀释涂布平板法分离纯化土壤中的微生物，其正确操作步骤是

 

①土壤取样      ②称取10g土壤加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中制备水壤提取液      ③吸取0.1mL进行平板涂布      ④依次稀释至10¹、10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶、10⁷的稀释度
A．①②③④B．①③②④C．①②④③D．①④②③
（二）酶在生产和生活中有着广泛的应用．回答下面有关酶应用的有关问题：
（1）如果手头有两种外观一致又没有包装的加酶洗衣粉，其中一种只含一种水解酶，另一种含有多种水解酶（已知不同水解酶的相对分子质量不同），生物老师根据洗衣粉中酶（蛋白质）与其他成分的不同理化性质，先除去洗衣粉中的非蛋白质的成分，请你再运用你学过的一种生物技术帮助老师把两种洗衣粉区分出来（只要求说出方法名称及其简单原理即可）：

 

．
（2）如果分别用等量的不同温度的水（从0°C～90°C）分别溶入加酶洗衣粉（含蛋白酶）来洗涤等量的有陈旧牛奶渍的棉质衣服，其洗涤效果用下列的哪一个坐标曲线图来表示较合适（横轴表示温度，纵轴表示洗涤效果）？答：

 

 图．

（3）应用果胶酶能够提高果汁产品的产量和品质．若上图横轴表示果胶酶的用量，纵轴表示果汁的产量，则在原材料有限的情况下，能正确表示相同时间内果胶酶的用量对果汁产量影响的是上面的

 

图．
（4）要想提高酶的利用效率，可以使用固定化酶技术．下面有关该技术的说法中，正确的是

 

A．物理吸附法的优点是操作简单，吸附牢固
B．物理吸附法容易对酶活性产生影响
C．包埋法的优点是操作复杂，条件温和，对细胞无毒毒性
D．凝胶包埋常用的凝胶种类有琼胶糖、海藻酸钠、醋酸纤维素、明胶和聚丙烯酰胺等．

Answer 1

考点：微生物的分离和培养,酶在食品制造和洗涤等方面的应用,制备和应用固相化酶,蛋白质的提取和分离

专题：

分析：1、培养基的成分有碳源、氮源、水、无机盐和生长因子．
2、影响酶促反应速率有温度、反应物浓度、酶浓度等．
3、固定化技术包括包埋法、物理吸附法和化学结合法（交联法），由于细胞相对于酶来说更大，难以被吸附或结合，因此多采用包埋法，固定化细胞在多步酶促反应中发挥连续催化作用，但如果反应底物是大分子物质，则难以自由通过细胞膜，从而限制固定化细胞的催化反应．固定化酶实质上是将相应酶固定在不溶于水的载体上，实现酶的反复利用，并提高酶稳定性，酶的各项特性（如高效性、专一性和作用条件的温和性）依然保持．

解答： 解：（一）（1）由于该表中培养基含有青霉素，故按用途分应为选择培养基．
（2）青霉素能抑制原核细胞细胞壁的形成，对真核细胞无影响，故霉菌或酵母菌可存活．
（3）配制培养基的步骤为计算→称量→溶化→调pH→灭菌→倒平板，鉴定大肠杆菌需要加入琼脂和伊红-美蓝，但大肠杆菌为原核生物，故还应出去青霉素．
（4）通过稀释涂布平板法分离纯化土壤中的微生物的步骤为土壤取样→溶解→稀释→涂布平板→培养．
（二）（1）要出去蛋白质和非蛋白质，应用凝胶色谱法，利用该种方法能将相对分子质量不同的蛋白质分离出来，如果利用该法仅能洗脱出单一的蛋白质，说明相应的该种洗衣粉只含一种水解酶，如果利用该法能洗脱出多种蛋白质，则说明相应的该种洗衣粉含有多种水解酶．
（2）温度对酶活性的影响为超过最适温度，酶的活性都将下降，故乙图符合条件．
（3）酶的浓度能影响化学反应的速率，随着酶浓度的升高，反应速率逐渐加快，但在原材料有限的情况下，最终会达到平衡状态，即曲线丙．
（4）固定化酶技术中由于细胞相对于酶来说更大，难以被吸附或结合，因此多采用包埋法，凝胶包埋常用的凝胶种类有琼胶糖、海藻酸钠、醋酸纤维素、明胶和聚丙烯酰胺等．
故答案为：
（一）（1）选择    
（2）B    
（3）调整pH和进行灭菌     青霉素   
（4）C
（二）（1）凝胶色谱法．通过该种方法能将相对分子质量不同的蛋白质分离出来，如果利用该法仅能洗脱出单一的蛋白质，说明相应的该种洗衣粉只含一种水解酶，如果利用该法能洗脱出多种蛋白质，则说明相应的该种洗衣粉含有多种水解酶
（2）乙     
（3）丙   
（4）D

点评：本题综合考查了酶的应用、微生物的分离及培养的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解，把握知识间的内在联系的能力．