Question

4．有甲、乙两个兴趣小组同学欲测定同一花盆土壤样品中细菌的种类和数量，用相同稀释倍数的土壤浸出液接种后在相同条件下培养，得到以下2种统计结果：

	甲	乙
培养基编号	1号	1号	2号	3号
培养基上的菌落数	230	39	222	276

（1）请对甲小组实验结果的有效性作出评价：
甲小组不合理，原因是没有设置重复组，结果不具有说服力（或实验时至少要设置三个重复实验）．
（2）乙小组的有效实验结果是179个菌落；此数值不能（能或不能）作为土壤中细菌的数量．若要确定细菌的种类，常用菌落的特征（或菌落的形状、颜色、大小等）作为鉴定依据．
（3）两个小组使用的接种方法是稀释涂布平板法，所用培养基按物理性质划分属于固体培养基；在接种前要对灭菌后的培养基进行倒平板，倒平板的目的是防止培养基污染．

Answer 1

分析 统计菌落数目的方法
（1）显微镜直接计数法
 ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数； ③缺点：不能区分死菌与活菌．
（2）间接计数法（活菌计数法）
 ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌．通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌．
②操作
a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性．
b、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数．
③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数．

解答 解：（1）分析表格可知，为了增强实验的说服力与准确性，需要设置重复组，而甲小组没有设置重复组，因此结果不具有说服力，即甲小组实验不合理．
（2）为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，并且计算平均值，乙小组的有效实验结果=（39+222+276）÷3=179个菌落；土壤中除了含有细菌以外，还含有霉菌、酵母菌等其他微生物，因此此数值不能作为土壤中细菌的数量．若要确定细菌的种类，常用菌落的特征（或菌落的形状、颜色、大小等）作为鉴定依据．
（3）只有稀释涂布平板法能够对微生物进行计数，因此两个小组使用的接种方法是稀释涂布平板法，所用培养基按物理性质划分属于固体培养基；在接种前要对灭菌后的培养基进行倒平板，倒平板的目的是防止培养基污染．
故答案为：
（1）①不合理     没有设置重复组，结果不具有说服力（或实验时至少要设置三个重复实验）
（2）179   不能    菌落的特征（或菌落的形状、颜色、大小等）
（3）稀释涂布平板法   固体培养基    防止培养基污染

点评 本题考查了测定某种微生物的数量以及微生物的分离与培养的有关知识，要求考生能够掌握微生物分离与培养的方法，掌握统计菌落数目的方法以及相关注意点，能够结合所学知识准确答题．