题目内容
图1为几种限制性核酸内切酶识别的序列和切割的位点．图2，已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位点．现用BamHⅠ和PstⅠ两种酶同时切割该DNA片段（假设所用的酶均可将识别位点完全切开），下列各种酶切位点情况中，可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是
A．1 为PstⅠ，2为EcoRⅠ，3为EcoRⅠ，4为BamHⅠ
B．1 为EcoRⅠ，2为BamHⅠ，3为BamHⅠ，4为PstⅠ
C．1 为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为BamHⅠ，4为PstⅠ
D．1 为EcoRⅠ，2为PstⅠ，3为PstⅠ，4为BamHⅠ
A．1 为PstⅠ，2为EcoRⅠ，3为EcoRⅠ，4为BamHⅠ
B．1 为EcoRⅠ，2为BamHⅠ，3为BamHⅠ，4为PstⅠ
C．1 为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为BamHⅠ，4为PstⅠ
D．1 为EcoRⅠ，2为PstⅠ，3为PstⅠ，4为BamHⅠ
考点：基因工程的原理及技术
专题：
分析：由于限制酶具有特异性，一种限制酶只能识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并形成特定的黏性末端．题干中提出“为防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状”，即要求目的基因两侧的黏性末端不同，因此一般选择不同的限制酶进行切割．
解答：
解：A、如果2为EcoRⅠ，3为EcoRⅠ则切割后含有目的基因的片段会形成相同的黏性末端，会出现自身环化，A错误；
B、如果2为BamHⅠ，3为BamHⅠ则切割后含有目的基因的片段会形成相同的黏性末端，会出现自身环化，B错误；
C、如果1 为BamH，3为BamHⅠ则切割后含有目的基因的片段会形成相同的黏性末端，但由于2处为EcoRⅠ会将1处给切割下，故形成的含有目的基因部分黏性末端不同，C正确；
D、如果2为PstⅠ，3为PstⅠ则切割后含有目的基因的片段会形成相同的黏性末端，会出现自身环化，D错误．
故选：C．
B、如果2为BamHⅠ，3为BamHⅠ则切割后含有目的基因的片段会形成相同的黏性末端，会出现自身环化，B错误；
C、如果1 为BamH，3为BamHⅠ则切割后含有目的基因的片段会形成相同的黏性末端，但由于2处为EcoRⅠ会将1处给切割下，故形成的含有目的基因部分黏性末端不同，C正确；
D、如果2为PstⅠ，3为PstⅠ则切割后含有目的基因的片段会形成相同的黏性末端，会出现自身环化，D错误．
故选：C．
点评：本题考查了限制酶的特点及应用，在基因工程中，一般为防止质粒或目的基因自身环化，一般选择不同的限制酶分别切割目的基因和质粒，以形成不同的黏性末端．
练习册系列答案
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