题目内容
【题目】科研人员采用如图所示的育种流程获得抗虫大豆新品种。请回答：
（1）常用___________技术扩增抗虫基因，将抗虫基因插入到T质粒上的T-DNA的原因是____________________________________________。
（2）在构建基因表达载体时为防止酶切产物自身环化，切割质粒时需用___________种限制，酶，酶切后形成的黏性末端序列应___________(填“相同”或“不同”)。
（3）将基因表达载体导入农杆菌时应用___________处理农杆菌，使农杆菌处于___________的生理状态，这种细胞称为感受态细胞。
（4）大豆外植体通过诱导形成愈伤组织的过程称为___________，愈伤组织通过再分化形成植株。该过程利用的原理是___________。
【答案】PCR Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞染色体DNA上 2 不同 Ca2+（CaCl2） 一种能吸收周围环境中DNA分子 脱分化 植物细胞全能性
【解析】
利用农杆菌转化法将抗虫基因导入植物细胞，构建重组Ti质粒时，需将含抗虫基因的DNA片段插入到Ti质粒DNA的T-DNA区域上，农杆菌侵染植物细胞后，可以使抗虫基因插入到植物细胞中染色体的DNA上。要把重组质粒导入土壤农杆菌，首先必须用Ca2+处理土壤农杆菌，使土壤农杆菌转变为感受态，然后将重组质粒和感受态细胞在缓冲液中混合培养完成转化过程。
（1）常用PCR技术扩增抗虫基因，将抗虫基因插入到T质粒上的T-DNA的原因是Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞染色体DNA上。
（2）在构建基因表达载体时为防止酶切产物自身环化，切割质粒时需用2种限制，酶切后形成的黏性末端序列应不同。
（3）将基因表达载体导入农杆菌时应用CaCl2处理农杆菌，使农杆菌处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，这种细胞称为感受态细胞。
（4）大豆外植体通过诱导形成愈伤组织的过程称为脱分化，愈伤组织通过再分化形成植株。该过程利用的原理是植物细胞全能性。
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