海洋中的发光细菌具独特的生理特性,可作为环境监测的指标生物。

I.(1)使用              法(答二种),可在固体培养基上获得单菌落,纯化发光菌株。

(2)细菌这类微生物在基因工程中有重要应用,试列举其中一项。

II.现利用发光细菌对海水重金属污染程度进行生物毒性监测,请完善下列实验设计并回答问题:

实验原理:细菌代谢正常时,发光强度稳定;当重金属影响到其代谢时,发光会受到抑制,抑制程度用抑光率(发光被抑制的百分率)表示。

实验材料:发光菌悬液、可能受重金属污染的待测海水水样、3%NaCl溶液、荧光分光光度计(用于测定细菌发光强度)、试管等。

(1)实验步骤:按下表配制待测海水样品稀释液。

组   别

1

2

3

4

5

3%NaCl溶(mL)

 

4.74

4.49

4.24

3.99

海水样品(mL)

 

0.25

0.50

0.75

1.00

发光菌悬液(mL)

 

0.01

0.01

0.01

0.01

混合液中海水浓度(%)

 

0.05

0.10

0.15

0.20

请完善实验步骤:

①1号试管中应加入:3%NaCl溶液、海水样品、发光菌悬液分别为           mL(3分)。

②各试管静置15min后,                                                    

(2)计算相对抑光率:按照公式T%=                           计算各组相对抑光率。

(3)如果测得上述各组相对抑光率如下:

组别

1

2

3

4

5

相对抑光率(%)

0

6

13

17

23

①请绘制海水浓度对相对抑光率影响的曲线(3分)。

②根据结果可以判断待测海水样品                                      

 

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