Question

【题目】毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIFⅡ)基因与绒山头羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。

(1)获取外源基因用到的工具酶是__________，为了提高实验成功率，通常利用______技术获得大量标记的外源基因。

(2)在过程②中，用____________处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。由于人们对动物细胞所需营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养细胞时需在培养基中加入一定量的____________，在培养过程中，应将培养瓶置于________培养。

(3)图中重组细胞的细胞核来自____________的细胞，若要获得多只相同的转基因山羊，可对图中早期胚胎进行________后进行胚胎移植。以上技术是在________(填“体内”或“体外”)完成的。

(4)下列有关基因工程的叙述正确的是________。

A．切割目的基因和载体DNA时为了获得相同的粘性末端，必须用相同的限制性核酸内切酶。

B．用基因探针可以检测目的基因是否表达

C．限制性核酸内切酶的作用只是用来提取目的基因

D．重组表达载体上含有RNA聚合酶的识别结合位点

Answer 1

【答案】 限制性核酸内切酶 RCR 胰蛋白酶 动物血清 CO2培养箱 导入目的基因 胚胎分割 体外 D

【解析】试题分析：熟记并理解基因工程的基本操作程序、动物细胞培养、核移植技术和胚胎工程等相关的基础知识并形成清晰的知识网络。在此基础上结合题意，从题图中提取有效信息，准确定位图中数字所示生理过程，进而对相关问题进行作答。

(1) 获取外源基因（目的基因）用到的工具酶是限制性核酸内切酶。RCR技术可以扩增目的基因，因此欲获得大量标记的外源基因，可利用RCR技术。

(2) 过程②借助的是动物细胞培养技术，用胰蛋白酶处理，可将羊胎儿皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养动物细胞时需在培养基中加入一定量的动物血清，且将培养瓶置于CO2培养箱中培养，以保证细胞对营养的需求和维持培养液的pH稳定。

(3) 图中重组细胞是由去核的卵母细胞与导入目的基因的细胞的细胞核重组而成。若要获得多只相同的转基因山羊，可对图中早期胚胎进行胚胎分割后进行胚胎移植。以上技术均是在体外完成。

(4)切割目的基因和载体DNA时为了获得相同的粘性末端，既可以用相同的限制性核酸内切酶，也可用不同的限制性核酸内切酶，A项错误；用基因探针可以检测目的基因是否导入受体细胞和检测目的基因是否转录出mRNA，但不能检测目的基因是否翻译出蛋白质，而基因的表达包括转录和翻译，B项错误；限制性核酸内切酶的作用是用来提取目的基因和切割运载体，C项错误；重组表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子、标记基因等，其中启动子位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，D项正确。