Question

研究人员将鱼的抗冻基因导入番茄体内，获得抗冻能力明显提高的番茄新品种．下列操作合理的是（　　）

• A、设计相应DNA单链片段作为引物，利用PCR技术扩增目的基因
• B、利用限制酶和DNA聚合酶构建基因表达载体
• C、将基因表达载体导入番茄细胞之前需用Ca²⁺处理细胞
• D、运用DNA分子杂交技术检测抗冻基因是否在番茄细胞中表达

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：基因工程技术的基本步骤：
1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
4、目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答： 解：A、获取抗冻基因时，可设计相应DNA单链片段作为引物，利用PCR技术扩增目的基因，A正确；
B、利用限制酶和DNA连接酶构建基因表达载体，B错误；
C、将基因表达载体导入番茄细胞的方法有基因枪法、花粉管通道法、农杆菌转化法，这三种方法都不需用Ca²⁺处理细胞，C错误；
D、运用DNA分子杂交技术检测抗冻基因是否导入番茄细胞中，但不能检测抗冻基因是否在番茄细胞中表达，D错误．
故选：A．

点评：本题考查基因工程的原理及技术，要求考生识记基因工程的原理、工具、操作步骤及应用，能运用所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记和理解层次的考查．