Question

13．武汉大学利用细菌将人的血清白蛋白基因导入水稻体内形成转基因水稻．据图回答相关问题．

（1）限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的识别序列及切割位点分别是-C^↓AATTG-和-G^↓AATTC-．为保证重组质粒表达载体的准确构建，应该用限制酶MunⅠ切割质粒，用限制酶EcoRⅠ_切割含目的基因的DNA片段，用DNA连接酶连接形成重组质粒．
（2）②过程常用的方法是农杆菌转化法_．
（3）③经历的生理过程主要有脱分化和再分化两个阶段．培育出转基因水稻完整个体所依据的生物学原理是细胞的全能性．
（4）基因工程的最后步骤是目的基因的检测与鉴定，在此步骤可对培育的植株进行分子水平的检测，可检测的物质有人血清白蛋白基因、人血清白蛋白基因转录出的mRNA、人血清白蛋白．

Answer 1

分析 分析题图：图示为转基因水稻培育过程图，其中①为基因表达载体的构建过程，该过程需要限制酶和DNA连接酶；②表示将基因表达载体导入受体细胞；③表示采用植物组织培养技术将水稻细胞培养成转基因水稻．

解答 解：（1）由图可知，目的基因两侧都是限制酶EcoRⅠ的切割位点，因此应选用限制酶EcoRⅠ切割含有目的基因的外源DNA分子；质粒中含有限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的切割位点，但EcoRⅠ的切割位点位于标记基因中，用其切割会破坏标记，因此为保证重组质粒表达载体的准确构建，应选用限制酶MunⅠ切割质粒，再用DNA连接酶连接目的基因和质粒形成重组质粒．
（2）②是将目的基因导入受体细胞的过程，当受体细胞是植物细胞时，常采用农杆菌转化法．
（3）③是将受体细胞培育成转基因植株的过程，该过程需要采用植物组织培养技术，其原理是细胞的全能性．植物组织培养包括脱分化和再分化两个阶段．
（4）基因工程的最后步骤是目的基因的检测与鉴定，在此步骤可对培育的植株进行分子水平的检测，可采用DNA分子杂交技术检测受体细胞受否含有人血清白蛋白基因，用分子杂交技术检测人血清白蛋白基因是否转录出的mRNA，用抗原-抗体杂交技术检测人血清白蛋白基因是否翻译形成血清白蛋白．
故答案为：
（1）限制酶MunⅠ限制酶EcoRⅠDNA连接酶
（2）农杆菌转化法
（3）脱分化　再分化　细胞的全能性
（4）人血清白蛋白基因　人血清白蛋白基因转录出的mRNA　人血清白蛋白

点评 本题结合转基因水稻的培育过程图，考查基因工程和植物组织培养的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、工具、操作步骤及应用，能准确判断图中各过程的名称，并能根据图中信息选择合理的限制酶；识记植物组织培养过程及原理，再结合所学的知识答题．