Question

2．酵母菌是发酵酿酒中常用到的菌种．回答下列问题：
（1）酵母细胞中蛋白质的提取和分离一般分为样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定四步．为了准确模拟生物体内的过程，保持细胞内外的PH一致，在样品处理的透析阶段，应将酵母蛋白溶液放入PH较低的缓冲液中．在装填凝胶柱时，不得有气泡存在，原因是气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱顺序，降低分离效果．
（2）用酵母菌酿制果酒时，温度应该控制在18-25℃；若所用果汁中混入了醋酸菌，在发酵过程中仍不会出现醋酸，其原因是醋酸菌是好氧型细菌，而果酒发酵是无氧环境．果酒制作是否成功，需发酵后在酸性条件下用重铬酸钾溶液来鉴定．
（3）获得纯净的酵母菌菌种是发酵酿酒的关键环节．为了筛选出酵母菌，一般在培养基中添加了青霉素，其目的是抑制细菌的生长．为了将分离到的菌株进一步纯化，挑取了菌落在3块相同平板上划线．结果其中一块平板的各划线区均未见菌生长，最可能的原因是接种环温度过高，菌种被杀死．

Answer 1

分析 1、蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定．
2、用凝胶色谱法进行血红蛋白的提取与分离的实验中，装填凝胶柱时不得有气泡存在，因为气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果．
3、检测酒精可用橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与乙醇（酒精）发生化学反应，在酸性条件下，变成灰绿色．
4、微生物的接种：微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，常用来统计样品活菌数目的方法是稀释涂布平板法．

解答 解：（1）血红蛋白的提取和分离一般分为4步：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定，纯度鉴定可用电泳法．为了准确模拟生物体内的过程，保持细胞内外的PH一致，在样品处理的透析阶段，应将酵母蛋白溶液放入PH较低的缓冲液中．在装填凝胶柱时，由于气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱顺序，降低分离效果，所以不得有气泡存在．
（2）果酒发酵的适宜温度是18～25℃．由于醋酸菌是好氧型细菌，而果酒发酵是无氧环境，所以果汁中混入了醋酸菌，在发酵过程中仍不会出现醋酸．酒精可与酸性重铬酸钾溶液发生化学反应，颜色由橙色变成灰绿色．
（3）纯化酵母菌常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，并且需要在培养基中加入青霉素，抑制其他微生物的生长，这种培养基属于选择培养基．为了将分离到的菌株进一步纯化，挑取了菌落在3块相同平板上划线．结果其中一块平板的各划线区均未见菌生长，最可能的原因是接种环温度过高，菌种被杀死．
故答案为：
（1）纯度鉴定   缓冲液       气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱顺序，降低分离效果
（2）18-25   醋酸菌是好氧型细菌，而果酒发酵是无氧环境    重铬酸钾
（3）抑制细菌的生长    接种环温度过高，菌种被杀死

点评 本题综合考查血红蛋白的提取与分离、果酒发酵、微生物的培养等相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力．