Question

18．某学习小组进行“培养液中酵母菌种群数量与时间的变化关系”的探究实验．
（1）本实验中，某学生的部分实验操作过程是这样的：①把酵母菌培养液放置在适宜的环境中培养，第7天开始取样计数；②用无菌吸管从静置试管中吸取酵母菌培养液少许；③加入血球计数板计数室，再盖上盖玻片，并用滤纸吸去多余菌液．请纠正该同学实验操作中的三个错误．
①第一天开始取样计数，连续七天；
②取样前振荡试管；
③先盖上盖玻片，再加入血球计数板计数室．
（2）血球计数板是一个特制的可在显微镜下观察的玻璃制品，样品滴在计数室内．计数室由25个中格、每个中格由16个小格、总共400个小格组成，每个计数室容纳液体的总体积为0.1mm³．现观察到图中所示a、b、c、d、e 5个中格80个小格内有酵母菌44个，其中被染色剂台盼蓝（分子量约为960）染成蓝色的有4个，则上述1mL酵母菌样品中应该统计的菌体数为2×10⁶个．对于压在小方格界线上的酵母菌应如何计数？取顶边，左侧边及其夹角．
（3）该学习小组同时做3组实验，分别测得三组培养液中酵母菌实验数据如下：（单位：万个/mL）

实验组别	1天	2天	3天	4天	5天	6天	7天
第一组	25	35	150	400	600	800	800
第二组	25	45	160	420	800	820	820
第三组	25	25	140	380	700	780	800

该学习小组将采集的数据经适当处理后，绘成如下曲线图，以表示1mL培养液中酵母菌的种群数量变化趋势．他们是如何处理上表中三组数据的？求其平均值
（4）到了第4天后，每次用血球计数板计数前，通常需要对酵母菌样液进行稀释，以方便计数．
（5）预计从第8天开始，1mL培养液中酵母菌的种群数量将开始下降，原因之一是养料不足．

Answer 1

分析 本题研究培养液中酵母菌种群数量与时间的关系，其自变量为时间，因变量为酵母菌种群数量．
酵母菌可以用液体培养基来培养，培养液中的酵母菌种群的增长情况与培养液中的成分、空间、pH、温度等因素有关，可以根据培养液中的酵母菌数量和时间为坐标轴做曲线，从而掌握酵母菌种群数量的变化情况．
利用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的细胞计数法，这种方法可以直接测定样品中全部的细胞数目，所以一般用于单细胞微生物数量的测定，由于血球计数板上的计数室盖上盖玻片后的容积是一定的，所以可根据在显微镜下观察到的细胞数目来计算单位体积的细胞的总数目．

解答 解：（1）①第一天开始取样计数，连续7天，进行前后对照．②取样前振荡试管使得酵母菌分布均匀．③先盖上盖玻片，再加入血球计数板计数室．
（2）由于细胞膜具有选择透过性，台盼蓝染液不能通过活细胞的细胞膜进入细胞，而死细胞的细胞膜失去选择透过性，变为全透性，因此实验中被台盼蓝染液染色的细胞为死细胞，这样图中所示a、b、c、d、e 5个中格内有酵母菌44-4=40个，平均每个中格有8个，计数室有25个中方格，共计有酵母菌8×25=200个．计数区体积为=0.1mm³，换算成1mL，则有酵母菌200×10³个，再乘以稀释倍数10，结果为2×10⁶个/mL．对于压在小方格界线上的酵母菌应取顶边，左侧边及其夹角的个体计数．
（3）该学习小组将采集的三组数据，求其平均值，绘成曲线图，以表示1mL培养液中酵母菌的种群数量变化趋势．
（4）到了第4天后，酵母菌密度太大用血球计数板计数前，通常需要将酵母菌样液稀释，方便计数．
（5）从第8天开始，由于养料不足、溶氧量减少、PH下降等因素的影响，1mL培养液中酵母菌的种群数量将开始下降．
故答案为：
（1）①第一天开始取样计数，连续七天
②取样前振荡试管
③先盖上盖玻片，再加入血球计数板计数室
（2）2×10⁶ 取顶边，左侧边及其夹角
（3）求其平均值
（4）稀释
（5）养料不足、溶氧量减少、PH下降

点评 本题考查了探究培养液中酵母菌种群数量的变化的实验方面的相关知识，要求考生掌握调查的方式和实验过程中的相关注意点；学会酵母菌计数的方法，并能利用公式对数量进行计算；具有一定的识图分析能力．