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降钙素是一种多肽类激素,临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低,半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素,将能人工合成降钙素的DNA与大肠杆菌的DNA分子进行重组,并成功地在大肠杆菌中得以表达。据图回答:
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图2
(1)图1示人工合成降钙素DNA的过程。从预期新型降钙素的 出发,推测相应的脱氧核苷酸序列,并人工合成了两条72个碱基的DNA单链,两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段,再利用Klenow酶补平,获得双链DNA。从功能看,Klenow酶是一种___________酶,合成的双链DNA有________个碱基对。
(2)本研究中最好选用的限制酶类型是 。
(3)从基因组成分析,HPV16E7重组质粒的受体细胞中不应含有Ampr(氨苄青霉素抗性基因),其目的是
(4)目的基因插入质粒后 ,不能影响质粒的 ,基因工程的载体除了质粒外,还可以有 、
(5)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在 的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测。
(1)功能 DNA聚合酶 126
(2)HindⅢ和EcoRⅠ
(3)便于筛选导入重组质粒的细胞
(4) 复制 λ噬菌体的衍生物、动植物病毒
(5) 蔗糖为唯一含碳营养物质
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