题目内容
H7N9型禽流感是全球首次发现的新亚型RNA流感病毒，目前最为快速有效的检测手段是RT-PCR核酸检测。RT-PCR的过程包括反转录作用从RNA合成 cDNA，再以cDNA为模板进行扩增，过程如下图所示。据此分析下列问题
（1）传统PCR技术的原理是_________，过程中低温退火的含义是____________________。
（2）在RT-PCR中每一步都有酶的参与，上图中过程1中的关键酶是___________；PCR中的关键酶是_____________，该酶的作用特点是_____________、_________________
________________________________。
（3）在对病毒核酸进行检测时，主要通过RT-PCR扩增其关键的基因序列，这时引物的设计就非常关键，根据下图分析，请你选择合适的引物____________。
（9分）（1）DNA复制 引物与模板链互补配对
（2）逆转录酶 Taq酶 耐高温 不能从头合成DNA，只能从3’端延伸DNA链
（3）引物Ⅰ和引物Ⅱ
解析试题分析：获得目的基因的方法：①从基因文库中获取 ②利用PCR技术扩增 ③人工合成（化学合成）。根据题意和图示分析可知：（1）传统PCR技术的原理是DNA复制；过程中低温退火的含义是让引物与模板链互补配对。（2）过程1是遗传信息从RNA到DNA，是逆转录，所以过程中的关键酶是逆转录酶。PCR中的关键酶是具有热稳定性的DNA聚合酶即Taq酶；该酶的作用特点是热稳定性高即耐高温，不能从头合成DNA，只能从3’端延伸DNA链。
（3）根据题意和图示分析可知：由于Taq酶只能从3’端延伸DNA链，所以选择的引物是引物Ⅰ和引物Ⅱ。
考点：基因工程
点评：本题难度中等，要求学生理解基因工程的概念，掌握基因工程的操作步骤，了解PCR技术在生产实践中的运用。
蓝天教育暑假优化学习系列答案（22分）
Ⅰ.（14分）某班级组织全班学生利用暑假开展某种单基因遗传病（由基因B－b控制）的调查活动，具体调查结果见下列表格。请依据题意回答：
|
家庭类型 |
Ⅰ |
Ⅱ |
Ⅲ |
Ⅳ |
总计 |
|
婚配组合 |
□ ×○568 |
□×●4 |
■×○45 |
■×●3 |
620 |
|
男性子代 |
□403 ■18 |
□0■3 |
□25 ■4 |
□0 ■2 |
455 |
|
女性子代 |
○425 ● 0 |
○3 ●0 |
○26 ●5 |
○0 ●2 |
461 |
分别表示健康男女 ■●分别表示患病男女
（1）据图中调查结果分析，可推断此遗传病为 性遗传病，此致病基因位于 染色体上。
（2）第Ⅰ组家庭的子代性状分离比并不是3:1，是因为其父母基因组成为 。
（3）通过调查与统计，此类遗传病的发病率在男性中发病率约为 %，在女性中发病率约为 %。
（4）测序结果表明，此致病基因与正常基因相比，其模板链中某段的GCG突变为GAG，推测密码子发生的变化是 。
（5）研究发现，致病基因表达的蛋白质与正常基因表达的蛋白质氨基酸数目完全相同，但空间结构发生改变。进一步研究发现，正常基因表达的蛋白质在细胞内能促进某种重要化合物的合成。据此推测，正常基因很可能是通过控制 从而控制人体性状的。
Ⅱ.（8分）2013年4月16日国家卫生和计划生育委员会公布，全国共报告人感染H7N9禽流感确诊病例77例，其中16人已死亡，禽流感再度备受关注。医学界正在致力于研究预防H7N9禽流感病毒的疫苗和单克隆抗体。由于来源于小鼠体的单克隆抗体，治疗效果不很理想。科学家决定采用基因敲除术将小鼠的 Ig 基因敲除，代之以人的 Ig 基因，然后用 H7N9 病毒去免疫小鼠，再经杂交瘤技术即可产生大量完全人源化抗体。下图是某科研机构的实验方案。请回答：
（1）此处基因敲除技术的受体细胞不是小鼠的受精卵，而是小鼠的 细胞，经技术处理后的该细胞，再重新植入小鼠脾脏中增殖。
（2）小鼠B淋巴细胞用B表示，小鼠骨髓瘤细胞用A表示，在培养液中，用灭活的动物病毒作促融剂，培养液中共有 种类型的融合细胞（只考虑两两融合）
（3）第一次筛选是选出 型的细胞（用字母组合表示），筛选具体方法是在培养基中加入某种物质，抑制骨髓瘤细胞DNA的复制，而B细胞DNA复制虽不受影响，但增殖能力很有限，只有杂交瘤细胞可以借助B细胞DNA复制的途径，继续增殖。此种培养基称为 培养基。
（4）将能产生抗H7N9病毒的杂交瘤细胞在动物培养液中进行培养，其培养液与植物组织培养的MS培养基相比，特有成分是 。
（5）利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒，用于准确、快速诊断H7N9禽流感病毒的感染者，这种诊断运用了 杂交技术。
（6）有人设想，能否利用经H7N9病毒免疫后小鼠效应T细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞，大量生产单克隆干扰素，用于H7N9禽流感患者的有效治疗。你觉得该方法
（可行/不可行），因为
Ⅰ.某班级组织全班学生利用暑假开展某种单基因遗传病（由基因B－b控制）的调查活动，具体调查结果见下列表格。请依据题意回答：
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家庭类型 |
Ⅰ |
Ⅱ |
Ⅲ |
Ⅳ |
总计 |
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婚配组合 |
□ ×○568 |
□×●4 |
■×○45 |
■×●3 |
620 |
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男性子代 |
□403 ■18 |
□0 ■3 |
□25 ■4 |
□0 ■2 |
455 |
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女性子代 |
○425 ● 0 |
○3 ●0 |
○26 ●5 |
○0 ●2 |
461 |
□ ○分别表示健康男女 ■●分别表示患病男女
（1）据图中调查结果分析，可推断此遗传病为 性遗传病，此致病基因位于 染色体上。
（2）第Ⅰ组家庭的子代性状分离比并不是3:1，是因为其父母基因组成为 。
（3）通过调查与统计，此类遗传病的发病率在男性中发病率约为 %，在女性中发病率约
为 %。
（4）测序结果表明，此致病基因与正常基因相比，其模板链中某段的GCG突变为GAG，推测密码子发生的变化是 。
（5）研究发现，致病基因表达的蛋白质与正常基因表达的蛋白质氨基酸数目完全相同，但空间结构发生改变。进一步研究发现，正常基因表达的蛋白质在细胞内能促进某种重要化合物的合成。据此推测，正常基因很可能是通过控制 从而控制人体性状的。
Ⅱ. 2013年4月16日国家卫生和计划生育委员会公布，全国共报告人感染H7N9禽流感确诊病例77例，其中16人已死亡，禽流感再度备受关注。医学界正在致力于研究预防H7N9禽流感病毒的疫苗和单克隆抗体。由于来源于小鼠体的单克隆抗体，治疗效果不很理想。科学家决定采用基因敲除术将小鼠的Ig 基因敲除，代之以人的 Ig 基因，然后用 H7N9 病毒去免疫小鼠，再经杂交瘤技术即可产生大量完全人源化抗体。下图是某科研机构的实验方案。请回答：
（1）此处基因敲除技术的受体细胞不是小鼠的受精卵，而是小鼠的 细胞，经技术处理后
的该细胞，再重新植入小鼠脾脏中增殖。
（2）小鼠B淋巴细胞用B表示，小鼠骨髓瘤细胞用A表示，在培养液中，用灭活的动物病毒作促融剂，
培养液中共有 种类型的融合细胞（只考虑两两融合）
（3）第一次筛选是选出 型的细胞（用字母组合表示），筛选具体方法是在培养基中加入某种物质，抑制骨髓瘤细胞DNA的复制，而B细胞DNA复制虽不受影响，但增殖能力很有限，只有杂交瘤细胞可以借助B细胞DNA复制的途径，继续增殖。此种培养基称为 培养基。
（4）将能产生抗H7N9病毒的杂交瘤细胞在动物培养液中进行培养，其培养液与植物组织培养的MS培养基相比，特有成分是 。
（5）利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒，用于准确、快速诊断H7N9禽流感病毒的感染者，这种诊断运用了 杂交技术。
（6）有人设想，能否利用经H7N9病毒免疫后小鼠效应T细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞，大量生产单克隆干扰素，用于H7N9禽流感患者的有效治疗。你觉得该方法 （可行/不可行），因为