Question

18．作物育种研究中常用农杆菌转化法将含抗虫基因的Ti质粒导入到植物体细胞中，再利用植物组织培养技术获得抗虫的农作物，下列关于该法的叙述正确的是（　　）

• A． 构建重组的Ti质粒需要限制酶和DNA聚合酶参与
• B． 农杆菌侵染植物细胞后，重组Ti质粒会全部整合到植物的染色体上
• C． 若检测到转基因植株的染色体上含抗虫基因，该植株一定会表现出抗虫性状
• D． 转基因植株是否能表现出抗虫性状是检验转基因成功与否的标志

Answer 1

分析 1、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
2、农杆菌转化法的原理：农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上．

解答 解：A、构建重组的Ti质粒需要限制酶和DNA连接酶参与，A错误；
B、农杆菌侵染植物细胞后，重组Ti质粒的T-DNA会整合到植物的染色体上，而不是全部Ti质粒都整合到染色体上，B错误；
C、若检测到转基因植株的染色体上含抗虫基因，这表明目的基因已经导入受体细胞，但该植株不一定会表现出抗虫性状，因为目的基因不一定能成功表达，C错误；
D、转基因植株是否能表现出抗虫性状是检验转基因成功与否的标志，D正确．
故选：D．

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题，能结合所学的知识准确判断各选项．