Question

在生物技术实践过程中，往往需要注意某些实验步骤的操作，请将下列实验中的注意事项填写完整：

（1）在腐乳的制作时，用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用           消毒。

（2）在“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”课题中，往往需要稀释土壤溶液，为了避免杂菌污染，此过程每一步都要在           旁操作。

（3）在提取植物细胞的DNA时，需要先用洗涤剂溶解           。

（4）在花药离体培养中剥离花药时，要彻底去除           ，因为与其相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。

（5）为避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液和蒸馏水等在使用前必须进行           。

（6）在固定化酵母细胞中加热溶解海藻酸钠时，最好采用           的方法。

（7）在血红蛋白的提取和分离中，若红细胞的洗涤次数过少，将无法除去           。

（8）胡萝卜素提取的萃取过程应采用           加热，因为有机溶剂都是易燃物。

 

Answer 1

【答案】

（除标注外，每空2分，共15分）

（1）沸水     （2）火焰     （3）细胞膜     （4）花丝     （5）高压灭菌

（6）小火间断加热      （7）血浆蛋白    （8）水浴（1分）

【解析】

试题分析：（1）腐乳的制作起主要作用的是毛霉，为了防止杂菌的污染，腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用沸水消毒。（2）稀释土壤溶液的实验操作中，为了避免周围环境中微生物的污染，应在火焰旁操作，因为酒精灯火焰一定范围内，由于温度比较高所以没有杂菌。（3）在提取植物细胞的DNA时，需要先用洗涤剂溶解细胞膜，动物细胞则用蒸馏水胀破。（4）在花药离体培养中剥离花药时，要尽量不损伤花药，否则接种后容易从受伤部位产生愈伤组织，同时还要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药，不利于愈伤组织或胚状体的形成。（5）PCR是进行DNA的扩增，为避免外源DNA等的污染，PCR实验中使用的相关器具如微量离心管、枪头、缓冲液和蒸馏水等应提前高压蒸汽灭菌。（6）在固定化酵母细胞中加热溶解海藻酸钠时，最好采用小火间断加热的方法。如果加热太快，海藻酸钠会发生焦糊。（7）血液中含量血浆、红细胞的等成分，血浆中的血浆蛋白存在会影响后期血红蛋白的提取，故应多次洗涤，除去血浆蛋白等杂蛋白。（8）胡萝卜素提取的萃取过程应避免明火加热，采用水浴加热，因为有机溶剂都是易燃物，直接使用明火加热容易引起燃烧、爆炸。

考点：本题考查腐乳的制作、土壤中分解尿素的细菌的分离和计数、DNA的粗提取、月季的花药培养、多聚酶链式反应扩增DNA片段、酵母细胞的固定化、血红蛋白的提取和分离、胡萝卜素的提取，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。