Question

2．微生物培养与分离技术是生物中重要的实验技术．根据有关的微生物知识，回答下列问题：
（1）培养基的制备需经过计算、称量、溶化和灭菌、倒平板等过程．上述过程中，需要在超净工作台上操作的是倒平板．
（2）纯化菌种时为了得到单一菌落，常采用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法；在对培养液中酵母菌的种群数量进行统计时，计数的方法是显微直接计数法．
（3）为达到筛选土壤中分解尿素细菌的目的，平板内的固体培养基应选择尿素作为唯氮源；培养基中加入指示剂酚红以鉴定其中是否含有能分解尿素的细菌．
（4）若要筛选分解纤维素的细菌，在土壤取样、选择培养后，需进行梯度稀释和涂布平板操作，通过染色并观察菌落周围透明圈的有无挑选出所需菌种．

Answer 1

分析 制备培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板．微生物接种的核心是防止杂菌的污染，保证培养物的纯度．
纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法．前者是指通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种，逐步稀释分散到培养基的表面；后者是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养．
从土壤中分离尿素分解菌的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株．尿素分解菌产生的脲酶能够将以尿素为唯一氮源的培养基中的尿素分解为氨，使pH升高，培养基中加入酚红指示剂后呈红色．

解答 解：（1）培养基的制备需经过计算、称量、溶化和灭菌、倒平板等过程，上述过程中需要在超净工作台上操作的是倒平板，防止杂菌的污染．
（2）纯化菌种时为得到单菌落，常采用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法，对培养液中酵母菌的种群数量进行统计时，计数的方法是显微直接计数法．
（3）为达到筛选土壤中分解尿素细菌的目的，平板内的固体培养基应以尿素作为唯一的氮源，培养基中加入酚红指示剂培养．
（4）筛选分解纤维素的细菌，在土壤取样、选择培养后，需进行梯度稀释和平板涂布操作，通过刚果红染色并观察菌落周围透明圈的有无挑选出所需菌种．
故答案为：
（1）灭菌　倒平板　倒平板
（2）平板划线法　　稀释涂布平板法   显微直接计数法
（3）氮源　酚红
（4）梯度稀释　　　涂布平板　　菌落周围透明圈

点评 本题考查微生物培养与分离技术的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力．