题目内容
（1）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染．某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株．回答问题：
①培养基的灭菌是将培养基放在温度为 压力为 的高压蒸汽灭菌锅内 分钟．
②在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基上．
③纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的两种接种方法是 ．
④为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围透明区的大小，透明区大说明该菌株的降解能力 ．
（2）常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，但是对酒精的耐受能力差．科学家利用基因工程培育了能利用这两种糖进行发酵且对酒精耐受能力强的酿酒酵母．将自然界中采集到的葡萄带回实验室，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，然后将瓶中的液体接种于固体培养基上，在适宜的条件下培养，获得各种菌落．
①将培养基上的酵母菌菌株转接到 的培养基中，无氧条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌不能利用木糖发酵．从存活的酵母菌中提取DNA，经大量扩增获得目的基因．
②将目的基因连接到质粒上，该质粒具有尿嘧啶合成酶基因作为标记基因．将重组质粒导入酵母菌时，应选择缺乏 能力的酿酒酵母作为受体菌．
③将上述获得的转基因酿酒酵母接种在以 为碳源的培养基中进行发酵能力测试．随着发酵的持续进行，若该酿酒酵母能够存活，说明它能 ，即说明所需菌株培育成功．
①培养基的灭菌是将培养基放在温度为
②在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以
③纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的两种接种方法是
④为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围透明区的大小，透明区大说明该菌株的降解能力
（2）常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，但是对酒精的耐受能力差．科学家利用基因工程培育了能利用这两种糖进行发酵且对酒精耐受能力强的酿酒酵母．将自然界中采集到的葡萄带回实验室，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，然后将瓶中的液体接种于固体培养基上，在适宜的条件下培养，获得各种菌落．
①将培养基上的酵母菌菌株转接到
②将目的基因连接到质粒上，该质粒具有尿嘧啶合成酶基因作为标记基因．将重组质粒导入酵母菌时，应选择缺乏
③将上述获得的转基因酿酒酵母接种在以
考点：微生物的利用,培养基对微生物的选择作用
专题：
分析：高压蒸汽灭菌的条件是压力升至102.9kPa（1.05kg/cm2），温度达121～126℃，维持20～30分钟．筛选能够分解原油的微生物需要使用一原油为唯一碳源的选择培养基．常用的固体培养基上的接种方法主要有平板划线法和稀释涂布平板法．筛选能够利用木糖的酵母菌需要使用木糖为唯一碳源的选择培养基．
解答：
解：（1）①高压蒸汽灭菌的条件是压力升至102.9kPa（1.05kg/cm2），温度达121～126℃，维持20～30分钟．
②筛选能降解原油的菌株，可以将样品稀释液置于以原油为唯一碳源的固体培养基中培养．
③菌株的接种方法，常用的有两种：平板划线法和稀释涂布平板法．
④菌株分解周围的营养物质，出现分解圈，分解圈大说明该菌株的降解能力强
（2）①在以木糖为唯一碳源的培养基中，只有能分解木糖的酵母菌能生存，可以用来选择能分解木糖的酵母菌．
②利用质粒标记基因表达的标记性状可以判断目的基因是否成功导入受体细胞，故应该选择缺乏尿嘧啶合成能力的酿酒酵母作为受体菌．
③转基因酿酒酵母能利用这葡萄糖和木糖进行发酵且对酒精耐受能力强，故应该接种在以葡萄糖和木糖为碳源的培养基中进行发酵能力测试．随着发酵的持续进行，若该酿酒酵母能够存活，说明它能利用葡萄糖和木糖产生酒精，且对酒精的耐受能力强．
故答案为：
（1）①121℃；1.05kg/cm2 15
②原油
③平板划线法和稀释涂布平板法
④强
（2）①以木糖为唯一碳源
②尿嘧啶合成
③葡萄糖和木糖 利用葡萄糖和木糖产生酒精，且对酒精耐受能力强
②筛选能降解原油的菌株，可以将样品稀释液置于以原油为唯一碳源的固体培养基中培养．
③菌株的接种方法，常用的有两种：平板划线法和稀释涂布平板法．
④菌株分解周围的营养物质，出现分解圈，分解圈大说明该菌株的降解能力强
（2）①在以木糖为唯一碳源的培养基中，只有能分解木糖的酵母菌能生存，可以用来选择能分解木糖的酵母菌．
②利用质粒标记基因表达的标记性状可以判断目的基因是否成功导入受体细胞，故应该选择缺乏尿嘧啶合成能力的酿酒酵母作为受体菌．
③转基因酿酒酵母能利用这葡萄糖和木糖进行发酵且对酒精耐受能力强，故应该接种在以葡萄糖和木糖为碳源的培养基中进行发酵能力测试．随着发酵的持续进行，若该酿酒酵母能够存活，说明它能利用葡萄糖和木糖产生酒精，且对酒精的耐受能力强．
故答案为：
（1）①121℃；1.05kg/cm2 15
②原油
③平板划线法和稀释涂布平板法
④强
（2）①以木糖为唯一碳源
②尿嘧啶合成
③葡萄糖和木糖 利用葡萄糖和木糖产生酒精，且对酒精耐受能力强
点评：本题主要考查微生物的筛选与分离，意在强化学生对微生物筛选的过程的理解与运用．
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