阅读如下资料:资料甲:图为科学家利用崂山奶山羊乳腺生物反应器生产某种蛋白质的流程图资料乙:“利用转基因番茄生产人胰岛素的方法发明利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素．所用的人胰岛素基因是根据植物“偏爱的密码子设计.通过人工合成若干DNA 片段.拼接而成．将该基因置于CaMV35S启动子和果实专一性启动子2A12的� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

16．阅读如下资料：
资料甲：图为科学家利用崂山奶山羊乳腺生物反应器生产某种蛋白质的流程图

资料乙：“利用转基因番茄生产人胰岛素的方法”发明利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素．所用的人胰岛素基因是根据植物“偏爱”的密码子设计，通过人工合成若干DNA 片段，拼接而成．将该基因置于CaMV35S启动子和果实专一性启动子2A12的驱动之下通过农杆菌介导的方法转入番茄中，在番茄的果实中表达人胰岛素．并且在胰岛素-COOH端加上KDEL内质网滞留序列，避免胰岛素在植物细胞中的降解．
资料丙：胰岛素A、B链分别表达法是生产胰岛素的方法之一．下图是该方法所用的基因表达载体．

（1）资料甲利用了蛋白质工程技术，该工程是指以分子生物学相关理论为基础，通过对基因修饰或基因合成，对基因进行改造，或制造一种蛋白质工程的技术．图中A表示推测应有氨基酸序列．
（2）资料乙中本专利利用了基因工程，可以利用PCR技术扩增目的基因，需要的原料有引物、DNA模板、原料和热稳定DNA聚合酶．通过农杆菌介导的方法将人胰岛素基因转入番茄的具体操作是：将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，用含有基因表达载体的农杆菌感染番茄植株的损伤部位，伤口处的番茄植株细胞会分泌大量的酚类化合物，吸引农杆菌移向这些细胞．通过农杆菌的转化作用，就可以使目的基因进入番茄植株细胞，并将其插入到番茄植株细胞中染色体的DNA上．
（3）图丙中基因表达载体中没有标注出来的基本结构是终止子．启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能启动目的基因的表达．氨苄青霉素抗性基因的作用是筛选含有目的基因的受体细胞．构建基因表达载体时必需的工具酶有限制酶和DNA连接酶．

分析基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答解：（1）蛋白质工程是指以分子生物学相关理论为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新蛋白质的技术．蛋白质工程的基本过程为：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因），因此，图中A表示推测应有氨基酸序列．
（2）PCR技术的条件有：引物、DNA模板、原料（四种脱氧核苷酸）和热稳定DNA聚合酶．通过农杆菌介导的方法将人胰岛素基因转入番茄的具体操作是：将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，用含有基因表达载体的农杆菌感染番茄植株的损伤部位，伤口处的番茄植株细胞会分泌大量的酚类化合物，吸引农杆菌移向这些细胞．通过农杆菌的转化作用，就可以使目的基因进入番茄植株细胞，并将其插入到番茄植株细胞中染色体的DNA上．
（3）基因表达载体的组成包括启动子、终止子、标记基因、目的基因、复制原点等，因此图丙中基因表达载体中没有标注出来的基本结构是终止子．启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能启动目的基因的表达．抗性基因作为标记基因，其作用是筛选含有目的基因的受体细胞．构建基因表达载体时必需的工具酶有限制酶和DNA连接酶，即首先要用限制酶切割外源DNA分子和运载体，其次要用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA分子．
故答案为：
（1）基因        蛋白质       推测应有的氨基酸序列
（2）原料      热稳定DNA聚合酶       T-DNA     酚类化合物      转化
（3）终止子         RNA聚合          筛选含有目的基因的受体细胞        限制酶和DNA连接酶

点评本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理、操作工具及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题．

练习册系列答案

请你推断参与该十二肽合成的丙氨酸数目为（　　）

9．下列在腐乳制作过程中加盐腌制的有关操作，正确的是（　　）

	A．	分层加盐，并逐层增加，瓶口处最厚
	B．	分层加盐，要小心且每层均匀
	C．	将盐溶于开水中，等冷却后加入瓶内，盐的浓度在12%为宜
	D．	应先加入卤汤，再加盐，以便使盐缓缓进入豆腐中

5．图是某植物细胞有丝分裂一个细胞周期中若干曲线变化图和和表示细胞有丝分裂各期的图象（乙图），请据图分析并回答下列问题：

（1）图甲中虚线表示分裂周期中染色体量的变化．
（2）乙图中的C相当于甲图中的DE段（用大写字母表示），结合甲图和乙图推测，甲图中的4N应该等于12．
（3）观察染色形态数目最佳时期是乙图中的D（字母）．

11．在培育克隆羊多莉的过程中，下列哪项技术没有用到（　　）

1．在对泡菜中亚硝酸盐进行检测时，所用的方法、有关试剂及颜色分别是（　　）
a．纸层析法 b．比色法 c．显微镜观察法 d．斐林试剂 e．双缩脲试剂
f．对氨基苯磺酸和H-1-萘基乙二胺盐酸盐 g．砖红色 h．蓝色 i．玫瑰红色．

8．用生命系统的结构层次分析，下列结构分别属于哪个层次（　　）
（1）受精卵（2）肝脏（3）血液（4）某山上所有的生物（5）某农场所有的水稻（6）一个池塘．

	A．	细胞器官组织群落种群生态系统
	B．	细胞组织器官种群群落生态系统
	C．	细胞器官组织种群群落生态系统
	D．	个体组织组织群落种群生态系统

5．所谓干细胞就是（　　）

	A．	细胞仍保持全能性的细胞		B．	具有分裂和分化能力的细胞
	C．	具有有丝分裂能力的细胞		D．	生物体上所有的细胞

5．

处于有丝分裂过程中的动物细胞，细胞内的染色体数（a）、染色单体数（b）、DNA分子数（c）可表示为如图所示的关系，此时细胞内可能发生着（　　）

	A．	中心粒移向两极		B．	着丝点分裂
	C．	细胞板形成		D．	染色单体变成染色体并向两极移动

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