Question

11．回答下列有关微生物的问题．
孔雀石绿（C₂₃H₂₅N₂Cl）常用作纺织业的染料，也可用作水产养殖业的杀菌驱虫剂．但它具有高毒性、高残留的危害，因此对孔雀石绿废水的处理已成为环境科学领域关注的热点．科研人员从某化工厂污水池中分离获得了能降解孔雀石绿的细菌菌株A．主要步骤如图1所示．

（1）①过程称为稀释，②过程是为了筛选．
（2）I号培养基中应加入孔雀石绿作为唯一碳源．使用稀释涂布平板（或平板划线）法接种可以在II号培养基上获得单个菌落．接种时的关键是“无菌”，确保无菌的方法有在超净台中进行接种、接种操作在酒精灯火焰附近进行、接种环（针）在接种前后要过火并烧成红色（写出2种）．
实验中使用的培养基和培养皿需要高压蒸汽灭菌法进行灭菌，高压蒸汽灭菌的要求是1.05kg/cm²（103kPa），121⁰C，时间15～30分钟，因为此条件下可以杀死包括芽孢在内的所有微生物．
（3）研究人员进一步研究了不同金属离子对菌株A降解孔雀石绿的影响，实验结果如图2．从图2中可以看出多数金属离子对菌株A降解孔雀石绿有抑制作用，唯有Pb²⁺的作用相反．若要排除Pb²⁺本身对孔雀石绿有降解作用，则应如何设置可作对照的培养基样本含等量的Pb²⁺但不接种菌株A．

Answer 1

分析 1、微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用．
2、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．

解答 解：（1）分析实验可知，图中①过程称为稀释，②过程是为了筛选能降解孔雀石绿的细菌菌株A．
（2）本实验的实验目的是从某化工厂污水池中分离获得了能降解孔雀石绿的细菌菌株A，I号培养基中应加入孔雀石绿作为唯一碳源．使用稀释涂布平板（或平板划线）法接种可以在II号培养基上获得单个菌落．接种时的关键是“无菌”，确保无菌的方法有在超净台中进行接种、接种操作在酒精灯火焰附近进行、接种环（针）在接种前后要过火并烧成红色．
实验中使用的培养基和培养皿需要高压蒸汽灭菌法进行灭菌，高压蒸汽灭菌的要求是1.05kg/cm²（103kPa），121⁰C，时间15～30分钟，因为此条件下可以杀死包括芽孢在内的所有微生物．
（3）由图分析可知，与不加金属离子的对照组相比，多数金属离子对菌株A降解孔雀石绿有抑制作用，唯有Pb²⁺的作用相反．若要排除Pb²⁺本身对孔雀石绿有降解作用，则应设置含等量的Pb²⁺但不接种菌株的培养基样本作为对照．
故答案为：
（1）稀释      筛选
（2）孔雀石绿      稀释涂布平板（或平板划线）     在超净台中进行接种、接种操作在酒精灯火焰附近进行、接种环（针）在接种前后要过火并烧成红色   1.05kg/cm²（103kPa），121⁰C，时间15～30分钟
（3）抑制         含等量的Pb²⁺但不接种菌株A

点评 本题主要考查微生物的利用、微生物的分离和培养的相关知识，要求考生能够识记微生物分离与纯化的方法，掌握消毒和灭菌的方法，能够根据题图获得有效解题信息，难度适中．