Question

【题目】为了研究不同“层次”血清对细胞增殖的影响，科研人员做了以下实验：将分离出的牛血清装入专用血清瓶后放入冰箱中直立静置一段时间。取三根刻度吸管，将血清从上到下轻轻吸成均等的三份，分别装入消毒后的瓶中，标记为上、中、下，再分别从三个瓶中吸取等量的血清置于另一小瓶中，混合均匀备用。分别取等量的不同“层次”的血清和混合血清加入到新配制的动物细胞培养液中，再接种小鼠上皮细胞（接种细胞密度为5×104个/mL），在适宜条件下培养72 h后，进行计数，结果如下表。请回答：

组别	上	中	下	混
72h细胞数/个mL-1	9.75×104	1.04×105	7.5×104	1.85×105

（1）细胞培养过程中，CO2的主要作用是____________，每天更换培养基的目的是____________。

（2）培养液中加入动物血清的作用是____________，还加入一定量抗生素的目的是____________。

（3）如果用血细胞计数板计数细胞时进行如图所示的操作，统计出来的数据比实际值偏____________。正确的操作方法应该是____________。

（4）从表中结果可以看出，不同“层次”的血清对细胞增殖的影响不同。造成这种结果的主要原因是不同“层次”血清中____________。

（5）根据实验结果，在动物细胞培养过程中，正确使用血清的方法是____________。

Answer 1

【答案】维持培养液的pH 补充营养物质，去除代谢废物，利于细胞增殖 补充细胞生长所需的未知物质 防止杂菌污染 高 先盖上盖玻片，后滴细胞悬液 成分不同 将血清充分混匀后加入到培养液中

【解析】

分析表格：表中为上、中、下三层血清及混合血清中细胞增殖情况，不同“层次”的血清对细胞增殖的影响不同，且均比混合血清中自爆增殖速度慢，因此在动物细胞培养过程中，正确使用血清的方法是将血清充分混匀后再加入到培养液中。

（1）动物细胞培养需要一定的气体环境，即95%空气+5%二氧化碳，其中二氧化碳的主要作用是维持培养液的pH；每天更换培养基可以补充营养物质，并能去除代谢废物，这样有利于细胞增殖。

（2）培养液中加入动物血清的作用是补充细胞生长所需的未知物质，还加入一定量抗生素的目的是防止杂菌污染。

（3）如果用血细胞计数板计数细胞时，应该先盖上盖玻片，后滴加细胞悬液，若先滴加细胞悬液，后盖上盖玻片，则统计出来的数据比实际值偏大。

（4）由表可知，不同“层次”的血清对细胞增殖的影响不同，且均比混合血清中自爆增殖速度慢，原因主要是不同“层次”血清中营养成分不同。

（5）由表可知混合血清中细胞增殖速率最快，因此在动物细胞培养过程中，正确使用血清的方法是将血清充分混匀后再加入到培养液中。