Question

如图表示利用基因工程培育抗虫棉的过程，请据图回答下列有关问题：

（1）若限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-↓GATC-，限制酶Ⅱ的识别下列和切点是-G↓GATCC-，那么在①过程中，应用限制酶Ⅱ切割质粒，用限制酶Ⅰ切割抗虫基因，这样处理的原因是

 

．①过程在

 

（体内/体外）进行．
（2）将通过②过程得到的大肠杆菌涂布在含有

 

的培养基上，能够生长说明已导入了普通质粒或重组质粒，反之则说明没有导入．
（3）在基因操作中，将重组质粒导入大肠杆菌的目的是

 

．
（4）经筛选分析，该植株细胞中含有一个携带抗虫基因的DNA片段，并表现出抗虫性状，因此可以把它看作是杂合子理论上，该转基因植株自交产生的F₁代中，仍具有抗虫特性的植株占总数的

 

．
（5）⑤过程所用技术称为

 

，从遗传学角度来看，根本原因是根细胞具有

 

．

Answer 1

考点：基因工程的应用

专题：

分析：DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体．限制酶：主要从原核生物中分离纯化出来．特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．形成黏性末端和平末端两种．

解答： 解：（1）质粒用限制酶II切割，可以保证只有一个切口，且只能将氨苄青霉抗性基因切割开；若用限制酶I切割的话，则会有两个切点，质粒就会被切为两段了，而质粒上的两个抗性基因都破坏了．而目的基因两端的特殊序列不同，用限制酶I切割好．综上用限制酶Ⅰ切割抗虫基因，这样处理的原因是获得目的基因，并能和质粒连接，同时能使质粒含有一个完整的标记基因．
①提取目的基因的过程是在生物体外进行的．
（2）由于用限制酶Ⅱ切割质粒，质粒上的氨苄青霉抗性基因切割开失去其作用，而四环素抗性基因没有被破坏，因此要说明已导入普通质料或重组质粒，应大肠杆菌涂布在四环素的培养基上．
（3）连接上目的基因的质粒转化大肠杆菌是为了让目的基因在大肠杆菌里扩增然后得到表达．
（4）该植株细胞中含有一个携带抗虫基因的DNA片段，并表现出抗虫性状，因此可以把它看作是杂合子理论上，这个杂合子的基因可表示为Aa，Aa自交后代中，含A_的概率为

3

4

．
（5）⑤所示的由一个植物细胞发育为一个完整的植株的技术叫植物组织培养，体现了细胞的全能性，而根本原因细胞中含有发育成完整个体的全部遗传物质．
 故答案为：
（1）获得目的基因，并能和质粒连接，同时能使质粒含有一个完整的标记基因   体外  
（2）四环素
（3）大量复制目的基因（抗虫基因）
（4）

3

4

（5）植物组织培养   发育成完整个体的全部遗传物质

点评：此题有一定难度，要解决这类问题一定要对基因工程中的三种工具和四个步骤要理解和灵活运．